一种适合水稻农杆菌转化的RNAi载体的构建和潮霉素对水稻转化的影响.pdfVIP

维普资讯 艋扬锯力 第33卷第2期(2007) 研 究报 告 PLANTPROTECTION Vo1．33No．2(2007) ·37 · [3] 陈元光．钦俊德．东亚飞蝗振翅频率的初步研究[J]．昆虫学 [7] 安学芳，朱幼玲．东亚飞蝗室内饲养繁育技术的建立及其相关 报．1961．10(4—6)：436—438． 研究[J]．上海实验动物科学，2003，23(3)：171—173． [4] 尤其儆．陈永林．马世骏．散栖型东亚飞蝗迁移习性初步观察 [8] 张龙，李洪海．虫口密度和龄期对东亚飞蝗群居型向散居型转 [J]．昆虫学报，1954，4(1)：1—1O． 变的影响[J]．植保技术与推广，2002．22(4)：3—5． [5] 张龙，严毓华，李光博，等．蝗虫微孢子虫病对东亚飞蝗飞行能 [9] 程登发，孙京瑞，曹雅忠，等．昆虫飞行测试系统[c]∥程登发．植 力的影响[J]．草地学报，1995．3(4)：324—347． 物保护研究进展．北京：中国科学技术出版社．1995：139—143． [6 蒋 湘．买买提明，张龙．夜间迁飞的亚洲小车蝗[J]．草地学报， [1O]王杰臣，倪绍祥．国内外蝗虫研究发展动向初探[J]．干旱区研 2003．11(1)：75—77． 究，2001．18(3)：36—40． 一 种适合水稻农杆菌转化的RNAi载体的构建和 潮霉素对水稻转化的影响 代玉华， 王锡锋 ， 李 莉， 周广和 (中国农业科学院植物保护研究所．植物病虫害生物学国家重点实验室，北京 100094) 摘要 以感染水稻条纹病毒(RSV)水稻叶片的总RNA为模板．利用RT-PCR扩增 出了RSV的cP基因。分别将正 反向的CP基因连接到载体pMCG161，再将此载体和pCAMBIA1301载体 同时双酶切，产物回收后连接，成功构建 了 适合农杆菌介导的水稻转化RNAi载体。在农杆菌水稻转化过程中，比较 了分化阶段是否加潮霉素对愈伤组织分化 的影响，结果表明，分化阶段去除潮霉素的筛选可以提高愈伤组织的分化程度但同时降低获得水稻植株的阳性率。 关键词 水稻条纹病毒； 载体构建； 潮霉素 中图分类号 Q782 ConstructionofaRNAivectorandeffectsofhygromycinB (Hyg)onricetransformation DaiYuhua， WangXifeng， LiLi， ZhouGuanghe (StateKe LaboratoryforBiologyofPlantDiseasesandInsectPests，InstituteofPlantProtection， ChineseAcademyofAgriculturalSciences，BeOing 100094，China) Abstract TheCP geneofRicestripevirus(f v)wasamplifiedbymve~etranscriptionpolymerasechainreaction (RT． PCR)from thetotalINA purifiedfrom infectedrice1~lves．Senseandantisenseof CPgenewereclonedintothepM- CG161plasmi ThiSvectorandpC删 A1301werebothdigestde withBamH