伪狂犬病病毒TK-gG-缺失株的构建及其生物学特性研究.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # %’ (! ) (# 年 月 !# $ !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 *+’, !# !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 伪狂犬病病毒! # $ % # 缺失株的构建及其生物学特性研究 徐晓娟 徐高原 陈焕春 刘正飞 何启盖 （华中农业大学动物医学院病毒室，武汉 #-$ ） 摘 要 将伪狂犬病病毒 I I O 突变株的基因组 与含有缺失的 基因的转移质粒 共转染 4H J KL J M7CN P)2 KL AQRHSS 猪肾传代细胞 ，待完全病变后收获病毒进行空斑试验，用 筛选 缺失的重组病毒。空斑纯化 次后，随 TH./3 TGU KL - 机挑取空斑进行TGU 扩增，证实所获得的病毒为均一的4HI J KLI 缺失株。遗传稳定性试验表明该重组病毒能在 TH./3 细胞上稳定遗传，动物试验表明该缺失株对S7’BJ C 小鼠极为安全且能保护S7’BJ C 小鼠抵抗致死量TU% 强毒 的攻击。该突变株的获得为我国伪狂犬病的控制和根除奠定了基础。 关键词 伪狂犬病病毒， I I O 突变株， I I 缺失株 4H J KL J M7CN 4H J KL 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） V$3# 2 /.-1/ !# #.3-!.# 伪狂犬病病毒（ ， ）属于疱 失失活的 I I 重组病毒株，将更适合于作为疫 TW5+XY7B;5W %;Y+W TU% 4H J KL 疹病毒科 .疱疹病毒亚科的猪 型疱疹病毒，能引 苗株。因此在 4HI J KLI J M7CN O 重组病毒株的基础 ! 起家畜和多种野生动物的急性传染病（伪狂犬病）。 上，我们构建了4HI J KLI 双缺失株。在临床上用该 该病对猪的危害尤为严重，主要引起妊娠母猪流产， 缺失株生产的疫苗免疫猪，结合鉴别诊断方法，即能 公猪睾丸发炎、萎缩、丧失种用能力，初生仔猪急性 将疫苗接种猪和自然感染猪区分开，从而淘汰自然 发病而大量死亡，猪是该病毒的贮藏宿主和传染 感染阳性猪，进而建立健康猪群。 ［］ 源/ 。上个世纪六七十年代，该病在世界各地广泛 ’ 材料与方法 存在，大多数西欧国家和美国都出现了该病的发生 和流行， 年代以来，伪狂犬病在我国也开始出现， 材料 Z ’( ’ 而且日益严重。目前，该病遍布我国大部分地区，严 毒株和细胞：伪狂犬病病毒鄂 （ ）株，由