兔出血症病毒中国株衣壳蛋白基因的克隆和序列分析.pdfVIP

维普资讯 18卷 2期 中 国 病 毒 学 18 (2)：129_一133 2003年4月 VIROLOGICA SINIGA April 2003 兔出血症病毒中国株衣壳蛋白基因的克隆和序列分析 严维巍 ，崔治中2，王永坤 (1．扬州大学畜牧兽医学院动物医学系，江苏扬州，225009；2．山东农业大学动物科技系，山东泰安，271018) CloningandSequencingoftheCapsidProteinGeneofRabbithemorrhagic diseasevirusIsolateW X84 YAN Wei．weilCUIZi．zhong2料 WANG Yong．kun1 ， ， rJ．AnimalScienceandVeterina‘ryM edicineCollegeYangzhouUniversity Yangzhou，225009，China；2．AnimalScience , CollegeShandongAgriculturalUniversiyt,Taian，271018，China) Abstract：Thecapsidprotein(VP60)geneofRabbithemorrhagicdiseasevirus(RHDV)isolateWX84 wasamplified byRT．PCR and cloned intopGEM R-T vectorfor sequence．Th e sequencena alysis showedthathtenucleotidesequenceofhtevp60geneofWX84was1740bpna dencodingaproteinof 580 amino acids．Sequence comparisonwith ohterpublishedRHDV vp60 genes showed htathte homologyofhtenucleotidewasbetween98．2％ nad99．0％．Th eresultshowedhtatvp60genewasa highlyconservedgene． Keywords：Rabbithemorrhagicdiseaseviurs；Capsidproteingene(vp60)；RT—PCR；Sequencenaalysis 摘要：应用 RT--PCR技术，从兔出血症病毒中国分离株 WX84中成功扩增出预期大小为 1．7kb的特异性条带， 将扩增产物提纯后克隆入 pGEM -T载体，经转化、筛选及酶切鉴定后，获得了该株病毒衣壳蛋 白基因的克隆， 序列分析表明扩增的中国株 RHDV衣壳蛋 白基因片段长度为 1740bp，共编码 580个氨基酸。该核酸序列与其它 国家报道的多株 RHDV序列相互间同源性高达 98．2％~99．0％，其推导的氨基酸序列同源性也达 98．3％~99．1％， 为极度保守片段。 关键词：兔出血症病毒 (RHDV)；衣壳蛋 白基因 (vp60)；序列分析：反转录聚合酶链式反应 (RT--PCR) 中图分类号：$852．65 文献标识码：A 文章编号：1003．5125(2003)02-0129．03 兔 出血症(RabbitHemorrhagicDisease，RHD)是