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第 25 卷第 2 期 食 品 与 生 物 技 术 学 报 Vol . 25 　No . 2 　 　 　 　　　　 　 2006 年 3 月 Journal of Food Science and Biotechnology 　 　 　　　　 Mar . 　2006 文章编号 (2006) 　 β 内切 葡聚糖苷酶的分离纯化及酶学性质 孟广荣 , 　杨树林 , 　曾亮亮 , 　李新柱 , 　蔡 凤 (南京理工大学 生物工程研究所 ,江苏 南京 2 10094) ( ) 摘 　要 : 利用 A¨KTA U PC900 快速蛋白液相色谱系统 F PL C 从黑曲霉发酵粉中分离纯化出内 β 切 葡聚糖苷酶 。分离纯化后的酶比活力提高了 8 . 1 倍 , 回收率为 7 . 5 % 。经 SD SPA GE 电泳分 析该内切酶的相对分子质量为 26 400 。酶学试验研究表明:该酶的最适反应温度为 55 ℃,最适 p H 为 4 . 8 , LineweaverBur k 法求得动力学参数 , Km 和 Vmax 分别为 6 . 838 ×103 mg/ mL 、 2 . 906 ×102 (mL ·min) / mg 。并确定了 F PL C 层析缓冲液的离子强度为 4 . 8 mmol/ L 时分离效 果达到最佳 。 β 关键词 : 黑曲霉 ;纤维素酶 ; 内切 葡聚糖苷酶 ;分离纯化 ;酶学性质 ;动力学 中图分类号 :Q 8 14 . 1 文献标识码 : A β Purif ication and Properties of an Endo gl ucanase M EN G Guangron g , 　YAN G Shulin , 　ZEN G Lian gliang , 　L I Xinzhu , 　CA I Feng (Biot echnology In stit ut e , Nanj ing U niver sit y of Science and Technolo gy , Nanj ing 2 10094 ,China) β Abstract : A n endo glucana se wa s i solat ed and p urified f ro m a co mmercial p rep aration of A sp erg i l l us ni g er by mean s of F PL C ( A¨KTA U PC900 ) . The sp ecific activit y of t he endo glucana se increa sed 8 . 1fol d , and recovery coefficient reached 7 . 5 %. The molecular weight wa s e stimat ed a s 26 400 by SD SPA GE. The op timal reaction t emp erat ure an d p H of t he endo glucana se 55 ℃ and 4 . 8 , re sp ectively . The