“红星”苹果花柱S-核糖核酸酶的分离与纯化技术.pdfVIP

业生物技术学报 Journal of Agricultural Biotechnology 2005,13 (5): 568~571 ·研究论文· 红星苹果花柱S- 核酸酶的分离与纯化 1 2 2 天忠 加藤直幹 奥野智旦 ， ，弘前 ( 1. 中国 业大学园艺植物研究所 北京 100094 ；2. 日本弘前大学 学生命科学部 036-8561) 邾 ： ，成功地从红星苹果 摘要 采用多种蛋白分离纯化技术，结合生物鉴定方法 ( Borkh.)花柱中纯化出了一类 与自交不亲和性识别反应相关的花柱蛋白。通过聚丙烯酰胺凝胶和等电聚焦电泳分析，确定该蛋白分子量为26 和28 kD ，等电 点为 10.2 和10.4 ，为碱性蛋白；核糖核酸酶活性染色和N- 末端序列分析结果显示具有核酸酶活性，且与其它蔷薇科植物花柱 S- 核酸酶N- 末端氨基酸序列同源性较高。邾 ： ；花柱； 关键词 苹果；自交不亲和性 S- 核酸酶；蛋白质纯化 Purification and Separation of Style S-RNases from Apple cv. Starking Delicious LI Tian-Zhong1 Katoh Naoki2 Okuno Toshikatsu2 邾 Two self-incompatibility relative proteins from styles of cultivar (Starking Delicious) of apple ( Borkh.) were identified by different protein isolation and purification analysis combined with bioassay. It was proved that the two pro- teins were alkalescent with molecular weights of 26 and 28 kD, and pIs of 10.2 and 10.4 by SDSand IEF. It showed by RNase activity staining that both of them have RNase activities. High homology of N-terminal amino acid with other Rosaceous plant styles S-RNase was found by blast.邾 apple; self-incompatibility; style; S-RNase; protein purification 蔷薇科植物苹果的自交不亲和性属于受 S 复 1.1 植物材料邾 等位基因控制的配子体型自交不亲和系统 (de Net- 材料采至日本弘前大学农学生命科学部附属藤 tancourt, 1977) 。当花粉的S 基因型与花柱的S 基因 崎 场。春季从田间大量采取苹果( 型相同时，萌发的花粉管在花柱上部的生长受到抑 Borkh.)红星(