可控硬度多层膜对肿瘤细胞行为的影响.pdfVIP

Vol.35 高等学校化学学报 No.8 2014年8月 摇 摇 摇 摇 摇 摇 CHEMICALJOURNALOFCHINESEUNIVERSITIES摇 摇 摇 摇 摇 摇 1822~1827 doi:10.7503/cjc 摇 摇 可控硬度多层膜对肿瘤细胞行为的影响 赵义秀,任科峰,李伯超,常摇 皓,计摇 剑 (浙江大学高分子科学与工程学系,教育部高分子合成与功能构造重点实验室,杭州310027) 摘要摇 以层状组装多层膜为基础,利用电化学方法精确可控的特点,构建了具有不同硬度的多层膜,并研究 了该材料体系对细胞行为的影响规律. 采用恒电流法,将聚吡咯(PPy)均匀复合进入聚赖氨酸/ 透明质酸 (PLL/HA)多层膜内部,通过控制通电时间得到不同交联度的(PLL/HA) @PPy多层膜. 利用纳米压痕技术 n 测试了多层膜在交联前后的硬度变化,并进一步研究了该多层膜体系对肿瘤细胞的黏附、增殖和迁移行 为的影响. 关键词摇 层状组装多层膜;聚吡咯;电聚合;硬度;肿瘤细胞;聚赖氨胶;透明质酸 中图分类号摇 O631摇 摇 摇 摇 文献标志码摇 A摇 摇 摇 摇 生物组织是由细胞及细胞外基质构成的,动物组织中的细胞不仅与相邻的细胞接触和作用,同时 亦与细胞外基质相接触和作用. 大量的研究发现,细胞外基质的物理机械强度是调控细胞行为的重要 因素[1~3] ,因而设计硬度可精确调控的材料对于进一步了解细胞与细胞微环境间的相互作用机理具有 重要的意义. 层状组装技术因制备工艺简单,组成结构可控,可选择生物相容性好的天然大分子组装等优点, [4,5] 已成为一种简单有效的制备类细胞外基质材料的手段 . 目前,调控层状组装多层膜硬度的方法有 [6] [7] [8] 离子交联 、化学交联 和物理交联 等. 电化学方法由于具有快速、高精度、低污染及操作简单等 优势,在很多研究领域得到应用. 然而,利用电化学方法对多层膜硬度进行调控的研究却非常少. [9] [10] 聚吡咯(PPy)是共轭型导电高分子,可通过化学法 和电化学法 合成,具有良好的生物相容 [11] [12] 性 、导电性、氧化还原特性、环境稳定性和制备过程简单等优点,已广泛应用于电化学传感器 和 [13] [14] 药物传递 等领域. Wang等 按照ISO10993 和ASTM1748鄄82标准对PPy 的体内和体外生物毒性进 行了系统的研究,结果表明,聚吡咯没有细胞毒性,不会引起急性或亚急性毒性反应,不会引起小鼠 体温度的变化,未产生血细胞溶血反应,也不会引发呼吸困难和抽搐等过敏反应. 因此,本文通过电 聚合恒电流法,使吡咯在聚赖氨酸/ 透明质酸(PLL/HA)层状组装多层膜中原位聚合,实现PPy分子链 与聚电解质分子链相互缠结,从而对多层膜硬度进行可控调节. 通过控制通电时间及多层膜中PPy 的 量,得到不同硬度的多层膜. 同时研究了在不同电聚合时间的多层膜表面上肿瘤细胞的黏附、增殖和 迁移等行为. 1摇 实验部分 1.1摇 试剂与仪器 4 4 聚赖氨酸(PLL,分子量3伊10 ~7伊10 )、 吡咯(纯度98%)、 对甲基苯磺酸钠、罗丹明鄄鬼笔环肽 (P1951)、牛血清白蛋白(BSA)和聚乙二醇辛基苯基醚(TritonX鄄100),化学纯,Sigma鄄Aldrich公司,吡 咯使用前减压蒸馏提纯;透