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茶籽粕(饼)中茶皂素定量检测方法综述 向 荣1方热军p (1湖南农业大学长沙410128) 摘要：对所有关于茶籽饼粕中茶皂素的定量测定方法进行归纳总结。测定茶皂素主要有重量法、比色法、 薄层扫描法和色谱法等。可根据试验的要求和目的，结合实际具备的仪器、试剂等，选择最合适的分析方法。 关键词：茶籽粕，茶皂素，定量，检测，进展 茶籽饼粕营养丰富，是潜力很大的饲料资源。 酸、香草醛一浓硫酸、对一二甲氨基苯甲醛、三氯 但茶籽饼粕含有茶皂素，对动物机体有很大毒害 化铁一浓硫酸法等。研究表明，比色法消耗试剂 作用。本文针对茶皂素，对现有的主要检测检验方 少，操作简便，分析快，重现性及准确度也较好，适 法综述如下。 用于工业分析。 1茶皂甙的分析方法 1．2．1间苯三酚法(皂甙糖体定量分析法)。 1．1重量法 该法基于测定水解前后糖含量之差，间接定 朱全芬等(1983)从糖体，配基两方面着手测量皂甙的含量。戊糖与己糖在非含氧酸存在的酸 定，对比出以其配基含量为基础的定量法较宜。茶 性条件下可转化成糖醛，糖醛进一步可与间苯三 皂甙能与铅、钡盐等作用产生沉淀，形成复盐，沉 酚作用形成有色物质，色泽强度与糖分含量呈一 淀剂的选择以碱式醋酸铅为好，其测定值稳定，干 定相关性。样品中除了茶皂素以外，尚有寡糖和多 扰少，误差范围小，重演性强。复盐在酸性条件下 糖存在，选用溶剂法提取茶皂素以排除多糖的干 又重新解离出金属离子和茶皂甙。除去金属离子 扰，再用碱式醋酸铅除去供试液中的茶皂素，测定 后，茶皂甙在强酸条件下水解，糖体被水解，获得 出其他糖分的含量，与供试液中总糖分测定值之 不溶于水的茶皂苷元。由茶皂苷元的含量可求得 差，计算出茶皂素的含量。 茶皂甙的含量。该法涉及到换算系数的问题，即 该法适用于实验室研究和工业分析中茶皂甙 lOOg茶皂苷元相当于多少克茶皂甙。理论上，一个含量的测定，操作简便快速，消耗试剂量少，重现 分子的茶皂甙水解可以得到一个分子的茶皂苷 性强。此法不仅能用于茶籽中茶皂素的定量分析， 元，但是茶皂甙是一类混合物，配基结构有多种， 亦适用于已知糖分种类的糖体定量分析。与重量 因此，不同研究者对于茶皂甙分子量的测定值略 法相比，2种方法都比较稳定，但间苯三酚法测定 有出入；茶皂甙中有机酸类也能发生上述反应，其 结果略高，且分析一个样品，间苯三酚法一般只需 结果的准确度亦受水解条件的制约；另外，该法虽 1个工作日，重量法至少需要3个工作日。 测定数值稳定、重演性强等优点，但分析时间长， 1．2．2苯酚一硫酸法。 操作繁复，难以满足工业分析的需要。 单糖或低聚糖在浓硫酸作用下迅速脱水生成” 1．2比色法 糠醛衍生物，与苯酚缩合成有色物质，其呈色与浓 比色法是利用三萜类皂苷的显色反应，选择 度呈线性关系，据此测定糖含量，从而间接测定皂 一种线性关系良好的显色剂，反应后用分光光度 甙的含量。岛田和子采用固相萃取柱的前处理方 计测吸光度，用对照品皂甙的标准工作曲线定量。 C18固体萃取 式，将茶叶浸出液加入到Sep—Pak 常用的显色剂有间苯三酚一乙醇溶液、苯酚一硫 柱，先用蒸馏水洗去水溶性的单宁，再用浓度20％ 43 万方数据 的甲醇洗去儿茶素，最后川浓度80％的rfl醇洗提巾茶色甙的提取造成了网难，使洲{|吲i果偏低。 得到含皂甙的Ff{醇溶液，真宅f燥F浓缩得到茶 I．2．4j氯化铁一浓硫舱法。 茶皂甙。j二：氯化铁(FeCI、／_Z--歧绿色的渺色反 皂素的粗品，测定了Gyokuro、Mat(·ha