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现代分子生物学技术在瘤胃产甲烷菌研究中的应用 张春梅1，杨艳玲2，施传信1 (1．商丘师范学院生命科学系，商丘476000；2．商丘职业技术学院畜牧兽医系，商丘476000) 摘要：瘤胃产甲烷菌代谢产生的甲烷气体，既能引起饲料能量的损失，又能引起温室效应，因此成为当前的一个研 究热点。了解瘤胃产甲烷茵菌群的组成及其多样性是对其菌群结构进行调控．并最终控制甲烷产生的基础。但由于 产甲烷茵培养条件要求苛刻，迄今为止只有少数几种产甲烷茵得到分离培养。现代分子生物学的迅速发展和应用． 突破了瘤胃微生物不可培养的限制．极大地推动了对产甲烷菌的研究。本文综述了现代分子生物学技术在瘤胃产 甲烷菌研究中的应用进展情况．并对其发展前景作了展望。 关键词：分子生物学技术：瘤胃甲烷菌：应用 温室气体甲烷对全球气候变暖的影响作用占到所 空间．也为探讨不同甲烷生成调控手段下瘤胃产甲烷菌 有影响气候变暖因素作用的15％～20％．其增温潜势是二 的变化以及微生物菌群的变化提供了强有力的手段。 氧化碳的62倍。2005年大气中甲烷的浓度为1 本文综述了现代分子生物学技术在瘤胃甲烷菌方面的 774ppb． 比1998年增加1 应用研究进展。 lppbIll。大气中70％以上的甲烷主要来 自于湿地、稻田、家畜、垃圾、森林、海洋、白蚁、反刍动物 1探针杂交技术 及动物废弃物的甲烷排放。随着全球对温室气体排放 探针杂交可以用来定量测定特定微生物种群16S 的重视．反刍动物甲烷气体的排放吸引了众多研究者的 重视。反刍动物瘤胃内的甲烷由产甲烷菌生成．通过暖 技术发现牛瘤胃中的优势甲烷菌为甲烷杆菌[21和甲烷 气排人大气。调控反刍动物甲烷排放不仅可以提高动 物生产性能．而且可以减少温室气体的排放。但瘤胃甲 生羔羊中的甲烷菌．结果表明所有检测到的甲烷菌均属 烷菌严格厌氧．很多甲烷菌为不可培养微生物．而且人 于甲烷杆菌，没有甲烷微菌、甲烷球菌和甲烷八叠球菌。 为培养的微生物与其自然界菌体在形态和特征上存在 出生7周后．羔羊瘤胃中仍然只有甲烷杆菌。随后人们 差异．因此到目前为止．研究者对甲烷菌的了解仍然 利用不同水平的组专一性、属专一性或亚种专一性等分 有限．对各种甲烷生成调控手段下瘤胃甲烷菌及微生物 类专一性探针来研究瘤胃微生物结构、不同种类微生物 菌群的变化知之甚少。现代分子生物学技术的发展．弥补 群体变化规律及功能等。Lin等[21分别以细菌、古菌和真 了传统研究方法的不足．为瘤胃微生物研究开拓了新的 核生物的rRNA为靶标的组专一性探针研究了牛、绵羊、 山羊和猪胃肠道的微生物区系结构，发现细菌、真核 收稿H期：2009—07—27 基金项目：商丘师范学院博士启动基金。 作者简介：张春梅(1976一)，女，河南虞城人，博士，讲师，研究方向为反刍 动物瘤胃微生态。 核生物的rRNA为靶标的组专一性探针研究了S叩i凡d瑚 种时使用的冻精成本：此外因BVDV造成的间接成本牛和所有之前未做牛病毒性腹泻病毒抗原的未产过犊 还有对其他牛造成的死亡、流产、不孕以及继续提高持 牛的未怀孕奶牛(包括流产牛)：(4)隔离怀孕母牛直至 续感染牛比率等等。因此，对牧场来说，PI牛没有任何 产犊，并检测新生犊牛：(5)每年需要对犊牛进行检测； 饲养价值。 (6)配种前检测所有之前未做牛病毒性腹泻抗原检测的 考虑到此病对易感牛群和牧场生产的严重危害． 公牛和后备母牛(自繁自养或外购牛)；(7)保存良好的 从牧场经营角度强烈建议对此病进行如下的净化步骤： 检测结果记录；(8)与兽医师合作设计包含最佳免疫疫 (1)只引进非持续感染牛；(2)引进地的怀孕母牛和其所苗和时机的免疫方案。包括对断奶前、断奶、后备牛配 产