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链霉菌原生质体种间融合提高细胞分裂素效价的研究.pdf
维普资讯
傲 生 物 学 报 29(5):”0—3 。1959
链霉菌原生质体种间融合提高细胞分裂素效价的研究
张靖溥 张震霖 尹荦耘
(中国农业科学院原子能和用研究睁亍,北京)
本文报道粉红孢类群的泾阳链霉菌与嵌紫灰链霉菌不液化亚种的原生质体砷间融合重组
的结果。刊用单 亲灭话和双亲栋的遗传标记筛选细胞分裂素的融合子,融合率为 10~一 1)一。
在所 得的融合菌株中,Fl211菌株的 CTK 教廿r为 292 g/L,FI613的 CTK 效价为 8卯
g ,比低产原始 亲株 提高 2—7倍,比高产亲株提高 0.3—3.0倍。在电子显徽镜下观寮到
融台过程o
关键 葡 照生质体融合;种间重组 ;细咆分裂素;泾 阳链霉菌;淡紫灰链霉菌不液化亚种
原生质体融合是一项新的有效的遗传 (stt)‘,氢苄青霉素抗性 (Amp),属扮红孢娄
育神技术,在国内外已得到广泛应用。我 群 ,为原始亲本;N-BI1—2株,由菌株 3经快中
子照射所得组氨酸缺陷型 (his),链霉素抗性
们试用这项技术,选育细胞分裂素 (Cytok—
(strT),氨苄青霉素抗性 (Amp),为直接条本。
inin CTK)高产菌株 CTK 的生理作
淡紫灰链霉菌不液化亚种菌株: INIT 为
用主要是促进 植物细胞分裂 ,在国际上 已
原养型,链霉素敏惑 (Str)‘, 氨苄青霉紊敏感
被誉为农业生产上很有潜力的激素 之 一 ,
(Amp)‘,属谈紫灰类链霉菌,为直接亲本菌株。
但 目前 CTK 的生产主要依赖化学合成,
(= )培养基
成本较高 ,不可能大面 积应用。利用微生 完全培养基 (cM)和基本培养基 (MM)见
物发酵生产CTK星一捷径,但首先要解决 参考文献(5】;Sm 培养基、P培养基和 Rl培养
菌种问题 。 泾阳链霉菌 “ (S;rep;orayees 基见文献 【胡;鹭粉 2号制剂培养基(%’):可溶性
jingyangensisTao。197s)(代号 5406菌) 建粉 2,黄 豆饼粉 2.5,葡萄糖 l,KH PO·o.0+,
是我室选育的产CTK (以玉米素和 2ip为 NaC1o.3,CaCO。0.3,(NH. SO.0.3,pH7.0
主)和某些抗菌素 的菌株 ,但效价均较低; -- 7.j;选择培养基 :MM +Stt+AmP,MM +
Sc, MM + Ampo
淡紫灰链霉菌不液化亚种 (Streptomyy—
(三)亲本菌株的遗传标记和原生蘑体制备
lawndulae subsp. 。 “ f口 ,
两亲株分别经单萤落分离纯化后 J羁高 温 培
LN17)为我室新开发菌株 ,CTK 效价较
养 “或辐射处理 消豫染色体外的遗传困子,
高,但抗逆性较差 将泾阳链霉菌和谈紫
并用凝肢电泳法捡捌质粒消除株l的 DIIA ,测定
灰链霉菌不液化亚种进行种间原生质体融
质拉消除林的抗药性标记,通过诱变获得营养醯
合, 期集中丽菌之优点,本文报道实验
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