HPLC法测定PEG-EPO中丁二酰亚胺的残留量.pdf

· 686· 药学研究 ·JournalofPharmaceuticalResearch2014Vo1．33，No．』? HPLC法测定 PEG—EPO 中丁二酰亚胺的残留量 庞甲佩 ，逄建勇 ，胥国立 ，解福生 (1．山东阿华生物药业有限公司，山东 东阿252201；2．山东东阿阿胶股份有限公司，山东 东阿252201) 摘要：目的 建立聚乙二醇重组人促红素 (PEG—EPO)中丁二酰亚胺残留量测定的高效液相色谱法。方法 使用高效液相色谱法，色谱柱为ShiseidoCapcellPAKC AQ (4．6nlm ×250mm，5tz．m)，流动相为 0．02mol·L KHP0 (pH6．5)，检测波长为210nnl，流速为0．7mL ·nlin～。结果 线性范围为0．08～0．8 g(r=1)，6次重复 进样峰面积响应值的RSD为0．61％，平均加样回收率为 100．96％。结论 建立的高效液相色谱法简单、精密度 良 好、准确度 良好 ，可用于PEG—EPO中丁二酰亚胺残留量检测。 关键词：聚乙二醇重组人促红素；丁二酰亚胺；高效液相色谱 中图分类号：R927．1 文献标识码 ：A 文章编号：2095—5375(2014)12—0686—003 Determination ofsuccinimideresidualin PEG —-EPO byHPLC PANGJia-pei。，PANGJian—yong 。·，XUGuo—li-，XIEFu—sheng。 (．ShandongE—HuaBiopharmaceuticalCo．，Ltd．，Donge252201，China_2．Shandong Dong—EE—JiaoCo．，Ltd．，Donge252201，China) Abstract：Objective ToestablishamethodforthedeterminationofresidualsuccinimideinPEG —EPO by HPLC．Methods HPLCmethodwasusedandtheseparationwasperformedonacolumnpackedwithShiseidoCapcell PAKCl8AQ (4．6mmx250him，5 m)．Themobilephasewas0．02mol·L～KH2P04(pH6．5)．Thedetectivewave— lengthwassetat210nm．Theflowratewas0．7mL ·rain～．Results Thelinearrangewasgoodin0．08～0．8 g【r= 1)．TheRSD ofpeakareaofsixrepeatedsamplingwas0．61％．Theaveragerecoverywas100．96％．Conclusion Thees— tablishedmethodwassimple，highsensitiveandaccuratewithahighreproducibilityandcanbeusedofrthedeterminationof residualsuccinimideinPEG —EP0． Keywords：Pegylatedrecombinanthumanerythropoietin(PEG—EPO)；Succinimide；HPLC 人促红细胞生成素(Erythropoietin，EPO)是一 减缓重组人促红素在体 内降解速度，延长重组人促 种激素类糖蛋 白，相对分子量为 30kD，它的功能是 红素的半衰期，减少注射次数至每两周 1次，减轻病 促进红 系祖细胞增殖，使 之分化 为成熟 的红细 人痛苦，并保证了药效。 胞 。重组人促红素(rhEPO)是通过基因工程技术 在适当的反应条件下，mPEG—SBA和 EPO的 生产 EPO，使之成本更低廉 ，质量更稳定。临床上 N末端