光敏核不育水稻叶片中钙调素mRNA原位杂交分析.pdfVIP

维普资讯 43,8 植物生理学通讯 第34卷 第 6期，1998年 12月 8厂qI f／。} 光敏核不育水稻叶片中钙调素mRNA原位杂交分析(简报) 毕学知2陈绍荣(武汉大学生命科学学院，武汉43eo~) ， — — 一 r — — — ～ AnalysisofCalmOdlllinmRNA iⅡPhotoperiod-sensitiveGenie1V[ale-ster- fieRiceI七avesUsing ／nS／m Hybridization BIXu~Zhi，㈣ 唱 ( of~fi ，WuhanUnv／erdty，Wuhan430072) 提要 采用组织 RNA原住杂交技术研究钙调 本文 旨在利用地 高辛 (digoxigenin)标 记 的 素基 固在光教楮不育水稻接受光周期信号后时空表 CaM反义 RNA探针 ，通过组织 RNA原位杂 选特征的蛄果表明，钙调素基因在不同光周期诱导 交技术研究CaM基因在叶片接受光周期信 后，叶片在育性转换对光用期教感的不同发育时期 号后的时空表达特征，探索其在 I~~MR育性 中，mRNA表迭量和空问分布上没有明显的差异，与 转换过程中转录水平的差异及空间定位和时 光敏辕不育水稻育性不存在直接的关系；叶由细胞 中钙调素mRNA的太量表连，可能与光敏色素信号 间分辨，为了解育性基因表达调控的机理提 系统调节叶绿体发育厦光台作用有关。 供线索。 关键词 萋j童 坠 星焦盎交 垄苎苎至! 材料与方法 水稻 材料为光周期敏感突变体水稻 (0r脚 钙调素 (caM)在钙(ca2)信号转导系统 sI ．却0胁 口)I~~MR农垦 58s及野生 中起着重要作用，调节许多细胞和生理功 稻对照品种农垦 58，种子 由本室多年纯化保 能 1【』。在植物光形态建成和成花反应的光周 存。水稻种子按常规方法播种，网室盆栽。 期诱导 中，CaM参与调控过程 2【J。Neuham 短 日照 (8h)诱导幼穗分化至二次枝梗分化 等Hj发现 ，CaM可诱导受光敏色素调控的叶 期，分长 日照 (16h)和短 日照(8h)两组处理。 绿体组分 LHCⅡ、OEE1、D1、IY2、ATP合成酶 分别在处理 当天和处理后 5、10d，取倒数第 1 的a、7亚基和RbeS的合成 ，但不能诱导花色 片全展叶片中段．取样时间为见光后4h。叶 素和 PS1、Cythd复合体蛋 白合成。Bowler和 片切成小段后用 FAA(10％甲醛、50％乙醇 、 0Iu J也证明．在光敏色素调节叶绿体的完 3％冰乙酸、DEPC．H20)抽真空固定 ，4℃下保 全发育和花色素苷的合成反应中，ca2．CaM 存备用。 和cG 两个信使系统参与了光信号的转 CaMeDNA由Sasaki等LJ分离，日本水稻 导。光 敏核 不育水稻 (Photoperiod．sensitive 基因组研究计划 (JapaneseRiceGenomeRe． g~niemale-sterileflee，P(MR)是我 国发现 的 searchlh~gram)Nagana~ 博士提供，长度为 一 种光周期敏感突变体，在一定程度上具有 0．8kb，克隆在 pBluescriptIISK 质粒中，克隆