矮牵牛离体培养和快速繁殖研究.pdfVIP

矮牵牛离体培养与快速繁殖研究 王广东詹圆凤尹兴芳房伟民 (南京农业大学园艺学院，南京，210095) 摘要：对重瓣矮牵牛茎段进行离体培养研究，以MS培养基添加不同浓度的扣BA、NAA 等堕塑圭量塑芏型进行壅堡垒熟透量、虿定芽分化、增殖及生根研究。结果表明：以MS+6-BA2．0 mg／J+NAA 0lm鲫培养基最适于愈伤组织的诱导，MS+6-BAlOm鲥+NAA0．1m鲥为最佳分 化培养基·MS+6-BA0．2m鲈+NAA005rag／|为最佳增殖培养基，无激素I／2MS培养基生根效果较 好．此外重瓣矮牵牛对不同激素浓度反应敏感，高于或低于最适浓度对生长不利。 关键词：矮牵牛(Petunia hybrida)；茎段；离体培养 矮牵牛(Petunia hybrzda)是茄科矮牵牛属一年生或多年生的草本植物，又名碧冬茄， 原产南美洲的阿根廷，早春及初夏开花，花团锦簇，花期长达3—4个月，颜色丰富多样， 有大红、洋红、紫红、白色以及由两种颜色嵌合成的复色，有单瓣与重瓣，布置花坛、花径、 妆点庭院的好材料。【lJ矮牵牛的常规繁殖采用种子播种，但种子播种的实生苗易产生变异， 尤其是重瓣品种及复色品种，无法将其性状固定下去。采用扦插、分株等营养繁殖，都有可 能感染数种病毒，导致植株长势变弱，影响产品质量。应用植物组织培养技术不仅可以缩短 周期，得到大量整齐、健壮、稳定的优质种苗，而且还可以降低成本，产生显著的经济效益。 本试验对重瓣矮牵牛进行茎段离体培养研究，试图探讨一种矮牵牛种苗快速繁殖的有效方 法。 1材料和方法 1．1试验材料 试验所用矮牵牛取材于无锡梅园园艺技术中心，品种为国外引进重瓣矮牵牛品种，取材 部位为带腋芽的茎段。 1．2试验方法 1．2．1外植体的准备：从健壮植株上切取带腋芽的茎段，在自来水下冲洗2—4小时，去叶后 将茎段切成3—4cm的小段移至超挣工作台上，用75％乙醇溶液处理30秒后，再用0．1％的 升汞溶液处理10分钟(升汞内滴加l—2滴吐温-80)，然后用无菌水冲洗3—5次，用于起始 培养。 1．2．2起始培养：消毒后的矮牵牛茎段在无菌条件下切成lcm左右的小段，每段上有l—2个 腋芽生长点，将其竖直插入以MS培养基添加不同浓度的6-BA、NAA等植物生长调节剂的 起始培养基，诱导愈伤组织形成。培养基的pH值调节至5．8，培养室温度为25__-2℃，光照 15～17小时。 1．2．3不定芽诱导：将诱导形成的愈伤组织在无菌条件下切成lcm左右的小块接于以MS培养 基添加不同浓度的6-BA、NAA的分化培养基上，诱导不定芽的形成。培养室的温度为25± 2℃．光照时数15．16小时。 1．2．4继代培养：无菌条件下切取分化培养基上形成的不定芽。接种于MS添加不同浓度的 130 6-BA，NAA等植物生长调节剂的增殖培养基上进行增殖培养，培养室温度25±2℃，光照时 数15～16小时．生氏25天后，统计增殖系数。 1．25生根培养：切取增殖培养基上生长至2-3cm的幼嫩植株接种于I／2MS添加不同浓度的 生k素的生根培养基上诱导生根，培养条件同增殖培养。 2结果与分析 2．1不同激素水平对愈伤组织诱导的影晌 接种子起始培养基中的外植体，10天后在外植体的切口处有疏松的淡黄色颗粒状愈伤 组织出现，诱导25天后，统计结果如下： 表1 不同激素对矮牵牛愈伤组织诱导的影响 TablelEffectofdifferenthormonelevelOncallusinductionofPetunia 诱导愈伤组织最适宜，不同激素的种类与浓度对矮牵牛的诱导不同，而在不加任何激素的 MS培养基中，愈伤组织也可以被诱导，但诱导率很低，仅有10％，且愈伤化程度很低。当 组织的诱导率为60％且愈伤化程度很高，而6-BA的浓度为4me,／I时诱导率仅有35％。由此 可见，2—3m鲋6-BA是适于愈伤组织的诱导。高浓度或低浓度的细胞分裂素是不利于愈伤 组织的诱导。 2．2不同激素水平对不定芽再生的影响 将诱导形成的矮牵牛愈伤组织接种于不同的再生培养基中．生长25天后，统计结果如 表2： 表2不同激素对矮牵