CD4%2bCD25%2b调节性T细胞对慢性丙型肝炎患者病毒特异性CD8%2bT细胞抑制作用研究.pdfVIP

中位数也达到了6年。 ALT水平受多种非肝脏独立因素影响，包括性别、年龄、BMI、吸烟、血脂和血糖代谢异常和锻炼 等，因此个体间存在明显差异。加上现行的脚正常标准制定于1950’s，确定ALT正常标准人群中包 括丙肝患者和非酒精性脂肪肝患者。所以现行标准无法准确评价ALT是否正常。一项前瞻性队列研究 建议将男性ALT正常值上限定为30IU／L，女性为19IU／L。同样也有研究表明，与0．5×ULNALT患者 xULN 相比，0．5～1×ULN和l～2 解释我们研究的发现：与0．0．75×ULNALT亚组相比，0．75。1×ULNALT亚组存在更高比例的肝脏显 著组织学改变(P=0．029)。 另外，我们发现年龄大于40岁的持续ALT正常患者发生肝脏显著组织学改变者的比例明显增高， 差异有显著性(P=0．005)，这与这部分患者不太可能还处在免疫耐受期相关。此外，在亚洲和其他地 rnl。而三分之二的HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者和所有的非活性性携带者病毒载量往往持续低于 型肝炎。因此，这也解释了为什么对于无论ALT正常或异常的慢性HBV感染患者，病毒载量、e抗原 状态都不能预测其肝脏显著组织学改变。 总而言之，无论病毒载量高低、e抗原状态如何，23．7％的持续ALT正常的慢性HBV感染者存在着 显著肝脏组织学改变，这部分患者也应该是抗病毒治疗的适应人群。因此，对可检测到病毒载量的持续 ALT ALT正常的慢性HBV感染患者应考虑进行肝脏活检，特别是那些年龄大于40岁且0．75～1×ULN 者。 BIO．，CD4+CD25+调节性T细胞对慢性丙型肝炎患者 V病毒特异性CD8+T细胞抑制作用的研究 孙丽杰 于建武李树臣 哈尔滨医科大学附属第二医院感染病科(150086) 李明荣 慢性丙型肝炎是严重危害人民健康的传染病，易发展成慢性丙型肝炎、肝硬化，且与原发性肝癌密 用，在移植物抗宿主病、自身免疫病、过敏性疾病等的发病机制和临床治疗中有潜在的应用价值。已有 Treg在慢性丙型肝炎患者中的数量、功能及其对HCV特异性CD8+T细胞增殖中的抑制作用。 材料和方法 一、病例来源 华医学会传染病和寄生虫病学分会肝病学分会联合制订的丙型肝炎防治指南，患者血清抗一HCV及HCV RNA阳性，排除了乙型肝炎病毒及人类免疫缺陷病毒感染，6月内均未接受抗病毒及免疫治疗。对照8 例，男6例，女2例，年龄18～35岁，肝炎病毒标志物及人类免疫缺陷病毒均为阴性，无饮酒及用过 一108— 对肝有损伤性的药物史。 二、试剂 (北京中杉金桥生物技术有限公司)，抗原多肽(美国Gene 肝癌细胞系HepG2由本科保存。 三、实验方法 1．HLA—A2+型别鉴定 用顺序特异引物聚合酶链反应技术(PCR—SSP)对所需病例进行筛选，所用引物(5’．末端引物序 术服务有限公司合成。其具体方法参照参考文献。 2．细胞的分离 CD4阴选 取患者和对照者外周血，密度梯度离心法分离PBMC，每106个细胞加人lOOtd磁珠、20td 抗体和20肚lCD25抗体，4℃混匀孵育，用磁力架(Dynal公司，瑞士)分离，操作按试剂盒说明进行。 3．靶细胞的制备 2000试剂盒 进行转染，按说明书操作。采用pcDNA3．1．core重组质粒299和Lipofectamine8t*l进行转染，加含10％胎 1111)进行稳定表达的筛选，3周后选出抗性克隆株扩大培养，收集细胞，加入O．5ml蛋白裂解液，作用 30rain，离心取上清液做Westemblot分析，检测核心蛋白。以未转染的细胞株为空白对照组，转染空白 质粒的细胞株为阴性对照组。 4．病毒特异性CD8+T细胞的诱导 第14d收集细胞检测其杀伤活性。以正常人作为对照。 5．细胞毒活性的检测