SFE-CO2技术萃取分离异黄酮苷元研究.pdfVIP

关于举办“第二届中草药提取关键技术与提取物产业应用”研讨会 SFE-C02技术萃取分离异黄酮苷元的研究 毛璞‘，肖咏梅，孟冬，谷克仁，李亚平 河南工业大学化学化工学院，郑州，450052 摘要：将分离蛋白乳清废液水解后，用超临界CO：技术提取异黄酮苷元。当以乙醇为夹带剂、 异黄酮的提取率为79．2％。同时ESI／MS确定在提取物中大豆苷元和染料木素为主要的异黄酮苷元。 关键]同：超临界二氧化碳萃取；分离蛋白乳清废液；异黄酮苷元 醇法制备浓缩蛋白和碱提酸沉法制备分离蛋白是植物蛋白生产的两种主要T艺。在分离蛋白 的生产过程中，有大量的分离蛋白乳清液。目前这些分离蛋白乳清废液仅是经过简单处理后直接 排放到环境中去，不但增加了环境污染，同时也损失了相当具有生理活性高附加值的异黄酮…。 大豆异黄酮分为游离型的苷元和结合型的糖营，苷元约一i异黄酮总量的2％、5％，其包括染料木 异黄酮糖苷在生物体内只有经水解生成苷元后，才能被吸收利用。因此将异黄酮糖苷水解成其相应 的苷元，制备高纯度苷元产品更具应用价值。 超临界C02萃取技术(SFE—CO：)具有气体的高扩散性和高渗透性、低粘度的特点，又兼有与液 体相近的密度和溶解度121，是一种对环境友好的提取方法。其特点是萃取过程可在常温下进行，且 无毒、无溶剂残留，是当前新的分离技术发展方向之一。特别适用于天然产物中生理活性物质的分 离精制，在化I：、食品、中药等领域已引起广泛的关注b1。本．1：作以大豆分离蛋白乳清废液为原料， 通过SFE-CO：提取其中的异黄酮苷元，考察不同条件对提取率的影响，获得最佳提取‘J：艺。此工作不 仅对污水的排前处理有积极作用，而且可以增加大豆产品的附加值，产生较好的经济效益和社会效 益。 大豆苷元：R1．H， 黄豆苷元：R。=H，R2=OCH。 构 1实验部分 1．1仪器与试剂 II 色谱仪(美国Agilent公司)；Micromass电喷雾质谱仪(MicromassLimited，UK)；Harwardpump 注射泵(SouthNatick，MA，USA)； 分离蛋白乳清液，由分离蛋白厂提供；甲醇(色谱纯)、95％乙醇、盐酸、硫酸、氢氧化钠等均为 1．2工艺路线 河南省科技攻关项目：“超I临界c02萃取法从豆粕中提取分离大豆异黄酮的研究”【032401001l】 河南省基础与前沿技术研究课题：“超声促进非水介质中的酶促反应及机理研究”【072300420070】 作者简介：毛璞(1965～)，男，副教授，研究方向：天然产物的提取与分离 14 关于举办“第二届中草药提取关键技术与提取物产业应用”研讨会 水解 中和 喷雾干燥广——————] I大豆分离蛋白乳清废液l[≥亡≥匕j[二今l含异黄酮苷元干粉l 超临界C02萃取广—————_]分离纯化． ．一浓缩 亡==二=≥l异黄酮苷元粗品l[==j 1．3SFE-CO：萃取实验 根据超临界流体的特点，选取夹带剂、萃取压力、萃取温度和萃取时间4个影响因素进行实验， 确定SFE-C02苯取大豆异黄酮苷元的最佳条件。 1．4提取率测定方法 大豆菅、染料木苷、大豆苷元、染料木素的混合标样通过HPLC检测。 色谱条件：色谱柱VenusilMP—C。s4．6×250删n；流动相是甲醇溶液(A溶液)和0．5％的乙酸水 溶液(B溶液)；在20min内梯度洗脱，A溶液浓度从30％线性增至70％；检验波长254nm；柱温50℃； 流速为1mL／min。 提取率=超临界提取后提取液中异黄酮苷元含量／样品水解喷干后粉末中异黄酮苷元含量× 100％ 1．5异黄酮苷元的ESI／MS分析 tl 将样品溶于色谱纯甲醇中，注射分析，流速10L／min。负离子质谱(ESI一／Ms)条件¨引：