氟诱导小鼠睾丸组织超微结构变化研究.pdfVIP

兽医部分 977 氟诱导小鼠睾丸组织超微结构的变化研究’ 张建海“ 贺俊平 梁琛王俊东一 (山西农业大学动物科技学院山西太谷030801) 摘要：为了研究氟中毒对实验小鼠睾丸组织超微结构的影响，以探讨其生殖毒性作用机制。64只雄性断乳小鼠随机 分为对照组和高氟组两组，每组32只，高氟组小鼠饮含150mg，LNab的水，对照组饮去离子水，两组均采食正常饲料，连续 105d。结果显示，氟染毒均可引起小鼠睾丸的生精细管基膜、各级生精细胞、精子发育、间质和支持细胞发生病理改变，可 观察到线粒体肿胀、空泡，滑面内质网扩张，核膜不清、精细胞顶体脱落等现象。其中。氟中毒对初级精母细胞和精子细胞 损伤最为严重，阃质细胞和支持细胞次之，对精原细胞的损伤较为轻微。这些变化可能是氟致雄性生殖功能损伤的机制之 一。 关键词：氟中毒，睾丸，超微结构，小鼠。 氟中毒是全世界广泛存在的一种入畜共患病。一般分为地方性(包括饮水型、燃煤型及饮茶型)、工 业性和饲料性氟中毒(主要为动物)三种。随着环境问题的不断呈现和动物及男性生殖功能的日趋下降， 工业性氟污染对动物及人类雄性生殖功能的影响成为近年来备受关注的热点。 众多研究表明，过量氟可对动物及人类雄性生殖功能产生损伤【l】。我们前期研究表明，过量氟可降 低雄性大鼠精液品质，导致性激素紊乱，睾丸组织脂质过氧化作用加强，代谢酶活性改变，以及相关细胞 因子表达水平降低池州。这提示，睾丸组织的正常组织结构发生了变化。然而目前，关于系统地对过量氟 致小鼠睾丸超微结构变化的报道较少。因此，本实验对氟中毒导致的小鼠睾丸组织各级生精细胞、支持 与间质细胞的超微结构进行了详细的研究，以期为进一步揭示氟的雄性生殖毒性机制提供形态学依据。 1材料与方法 1．1实验动物与分组 昆明种雄性刚断乳小鼠64只，平均体重(20 4-2)g，购自山西医科大学实验动物中心，适应性喂养一周 后进行试验。将实验小鼠随机分为2组，第一组为正常对照组，饮去离子水；第二组为高氟组，饮用含 NaF的去离子水，连续105d(约3个精子发生周期)。两组动物均饲喂标准的小鼠饲料。 150mg／L 1．2电镜标本制备 染毒结束后，每组随机抓取动物，20％乌拉坦麻醉，立即取出睾丸，加一滴2．5％戊二醛固定液，并迅 速切成小块后固定于该固定液中。然后，以l％锇酸后固定，以乙醇梯度脱水、渗透，用Epon812树脂包埋， LK82IV超薄切片机切片、醋酸铀及枸橼酸铀双染色，JEM2100CXⅡ型透射电镜观察拍片。 ·基金项目：山西省归国留学基金(2004043)；山西省科技攻关项目(2006026)。 删no ·÷·通讯作者：王俊东，教授，博士，博导。1．el：0354—6288206；E—mail：wangid@sxau．edu．珊。 978 2006学术年会 2 结果 2．1 氟中毒对小鼠精原细胞与精母细胞的影响 由图l～6可见，正常小鼠睾丸组织中生精上皮内A型精原细胞、B型精原细胞形态结构正常，细胞间 隙明显，细胞膜清晰、完整，核质均匀，细胞内线粒体和内质网未见有明显的病理变化。初级精母细胞位 于精原细胞上方，体积大，数量多，结构正常，胞质中线粒体较多，还可见内质网和核糖体等。 在氟中毒组，小鼠A型、B型精原细胞只有轻微的变化，主要表现为数量减少，线粒体肿胀，个别可见 有空泡；内质网轻度扩张，核染色质浓缩，甚至呈扁平形，个别细胞的局部可见坏死。初级精母细胞数量明 显减少，体积略有肿大、细胞质内线粒体肿胀、有空泡；内质网扩张，核染色质浓缩。 图2高氟组A型精原细胞。线粒体肿胀，内质网 图1对照组A型精原细胞。结构正常(8000X) 轻度扩张(8000X) 图3对照组B型精原细胞。形态结构正常(8000X)图4高氟组B型精原，线粒体肿胀、有空泡(8000X) 图5对照组正常结构的精母细胞。细胞器结构 图6高氟组精母细胞结构。线粒体有空泡、染色 完整。内外膜清晰、完整(8000X) 质固缩(8000X)