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中华中医药学会中药分析分会第六届学术交流会论文集 次乌头碱加热不同时间的成分变化研究 谭鹏+刘永刚 蔡莹 李飞4乔延江8 (北京中医药大学北京100102) [摘要]目的：分析次乌头碱在水中加热不同时间的产物及含量变化。方法：采用三重四级杆质谱，正离子 模式，得到总离子流图和二级质谱，根据乌头碱型生物碱裂解规律确定结构。以离子强度表征产物的含量 变化。结果：根据文献和二级质谱裂解规律，确定了次乌头碱在水中加热后产生次乌头次碱、焦次乌头碱、 次乌头原碱、脱水次乌头原碱4种产物，各产物含量随时间变化规律不一致。结论：采用质谱法得到了次 乌头碱在水中加热不同时间的成分变化规律，为乌头属中药炮制机理研究提供了依据。 [关键词]次乌头碱模拟炮制质谱 附子、川乌和草乌是常见的乌头属中药，生品毒性较大，炮制后毒性降低，古今的炮制 方法打80多种，包括多种不同的辅料和加热炮制工艺。现代研究发现，此类中药炮制毒性 降低，主要取决于乌头碱等双酯型生物碱的水解程度，其水解程度与炮制时温度的高低及加 热时间的长短有关，与所用辅料品种及用量多少关系不大…。因此，《中国药典》己将古今 各种炮制工艺统一为水进浸泡后蒸煮的湿热处理方法旧1。然而中药发挥作用的药效成分复 杂，在炮制过程中发生成分的水解、分解和结合等反应，而且非毒效成分也会与毒效成分之 间发生反应或者影响其反应的过程，通过单体成分在模拟饮片的炮制条件下炮制，可以将复 杂问题简单化，研究简单环境下的反应规律后，逐步扩展到饮片的整体炮制，明确炮制过程 中成分变化规律，为深入阐明炮制机理提供依据。因此，本文采用三重四级杆质谱法检测次 乌头碱在水中的模拟炮制不同时间的反应产物，为乌头属中药炮制机理研究提供依据。 1仪器和试药 Scientific 仪器：Thermo TSQ三重四极杆质谱仪。 试药：次乌头碱(自制，纯度98％)，乙腈(色谱纯，美国Fisher公司)，甲醇(色谱 纯，美国Fisher公司)，纯净水(杭州娃哈哈集团有限公司)。 2方法和结果 2．1质谱条件 lentZORBAX 色谱柱为Agi 脱，柱温25℃；流速1ml·min～，检测波长230 L。 nm；进样量1U ESI离子源，离子源温度350。C，毛细管电压3200eV，正离子检出模式，雾化压力30psi， (2009CB522805) 【作者简介】谭鹏，讲师，研究方向为中药炮制机理研究 4[通讯作者】李飞，教授，硕士生导师，Tel：(010E．mail：lf668@sina．com 乔延江，教授，博士生导师，Tel：(010Emaih yjqiao@263．net 43 中华中医药学会中药分析分会第六届学术交流会论文集 干燥氮气流速10L·min～，扫描范围：200-800u。 2．2供试品的制备 精密称取次乌头碱标准品3．30mg，置于50ml平底烧瓶中，精密加入水20ml，加热至沸 品进行质谱检测，每次取1毫升样品溶液，然后用lml水补足。 3结果 3．1降解产物的鉴定 乌头碱型生物碱在电喷雾正离子模式下形成质子化分子[M+H]+，通过质荷比和相关文献 旧‘6。数据可初步确定各离子峰的归属。质谱分析得到次乌头碱在水中加热不同时间的反应产 和90min样品的总离子流图分别见图1、2。 图1 次乌头碱在水中加热10min样品质谱图 图2次乌头碱在水中加热90min样品质谱图 轰击，轰击能量40ev，得N-级质谱，分析二级质谱碎片，确定产物结构。各反应产物的 二级质谱数据见表1。 准分子离子m／z574，与次乌头碱m／z616离子相差42Da，以子离子m／z542为基峰， 失去碎片CH30H(32)，同时有子离子m／z 次乌头碱的结构和参考文献旧1，认为m／z574离子为次乌头次碱，是次乌头碱C8位酯键水 解的产物。 准分子离子m／z556，与次乌头碱m／z616离子相差60Da，以子离子m／z524为基