川芎嗪对TGF-β_1诱导人胚肾近端小管上皮细胞转分化影响的实验研究.pdfVIP

578 重庆 医学2012年 2月第 41卷第6期 · 基础研究 · 川芎嗪对 TGF—l3诱导人胚肾近端小管上皮细胞转分化影响的实验研究 王俊然 ，郑素琴 ，邢红英。 (1．河北省唐山市妇幼保健 院病理科 063000；2．河北联合大学基础医学院病理学教研室，河北唐山 063000； 3．河北省唐山市唐海县医院病理科 063000) 摘 要 ：目的 利用原代培养的人胚 肾近端小管上皮细胞作为研究对象，探讨川芎嗪 (TMP)对转化生长因子 B (TGF-71)诱 导的人胚 肾近端小管上皮细胞转分化的影响。方法 采用胶原酶消化后系列网筛过滤 ，再用密度梯度 离心分离纯化细胞 的方法 ， 进行人胚 肾近端小管上皮细胞的原代培养。原代培养的人胚 肾近端小管上皮细胞传至第 2代后分为 5组，空 白对照组、10ng／ mLTGF-~11刺激组 、5ng／mLTMP+10ng／mLTGF-71l刺激组 、10ng／mLTMP+10ng／mLTGE-71l刺激组及 20ng／mLTMP+10 ng／mLTGF-71刺激组 。刺激 48h后 ，采用倒置相差显微镜、透射 电子显微镜、酶化学染色和免疫细胞化学方法检测细胞 的转分 化情况 。结果 TGF-71刺激人胚 肾近端小管上皮细胞后细胞拉长呈梭形，细胞 间隙加大；电子显微镜下细胞失去极性，微绒毛减 少直至消失；碱性磷酸酶染色阴性 ；细胞角蛋 白18(CK一18)表达减弱，波形蛋 白(Vimentin)表达增强，并表达 a平滑肌肌动蛋 白抗 体 (a—SMA)。各浓度 TMP+10ng／mLTGF-71 刺激组细胞的上述变化均有不 同程度 的减弱 ，减弱程度与 TMP浓度呈正 比。结 论 TMP能以浓度依赖方式阻止 TGF-71诱导的人胚 肾近端小管上皮细胞的转分化 。 关键词 ：细胞转分化 ；转化生长 因子 B；川芎嗪 ；人胚 肾近端小管上皮细胞 ；肾间质纤维化 doi：10．3969／j．issn．1671—8348．2012．06．024 文献标识码 ：A 文章编号 2012)06—0578—03 Experimentalstudyon effectofligustrazineon transdifferentiation ofprimary culturehumanembryorenalproximalepithelialcellsinducedbyTGF-[1l WangJunran ，ZhengShuqin ，XingHongying。 (1．DepartmentofPathology，TangshanMaternalandChildHealthHospital，Tangshan，Hebei063000，China； 2．DepartmentofPathology，CollegeofBasicMedicine，HebeiUnitedUniversity，Tangshan，Hebei063000China； 3．DepartmentofPathology，TanghaiCountyHospital，Tangshai，Hebei063000，Chian) Abstract：0bjective Toinvestigatetheeffectofligustrazineonthetransdifferentiationofprimaryculturehumanembryorenal proximalepithelialcellsinducedbyTGF-711．Methods Thecorticaltissuewasdigestedwithcollagenase，andremovedcontaminating glomeruliandlargerfragmentsbyfiltration，thenfurtherpurifiedbyisopycniccentrifugationusingPercol1．Theculturedcellswere dividedintofive