鬼臼毒素纳米脂质载体的制备及体外对HPV感染的永生化人宫颈上皮细胞的作用.pdfVIP

2011;31(6) 南方医科大学学报（J South Med Univ ） ·1023 · ·基础研究· 鬼臼毒素纳米脂质载体的制备及体外对HPV 感染的永生化人宫 颈上皮细胞的作用 1 1 2 2 1 1 种树彬 ，曾 抗 ，李国锋 ，任 非 ，朱晓亮 ，周金洁 1 2 南方医科大学南方医院 皮肤科，药学部，广东 广州 510515 摘要：目的研究鬼臼毒素纳米脂质载体(POD-NLC)的体外对HPV 感染的永生化人宫颈上皮细胞的作用。方法采用乳化 蒸发法制备POD-NLC ，分别应用扫描电镜、粒径仪、高效液相法等方法研究其表征，并观察其稳定性。分别以不同浓度 (0.0001~ 1 µg/ml)的POD-NLC 和鬼臼毒素(POD)处理H8 细胞，采用MTT 法检测细胞的增殖活性，以荧光显微镜观察细胞 的形态变化，流式细胞术（FCM）检测其凋亡率和细胞周期。结果 ①制备的POD-NLC 扫描电镜下呈球形，有较好的稳定 性，粒径为（85.6± 10.25）nm ，电位为（26.2±4.1）mV ，包封率为（88.56±3.1）% ；②POD-NLC 能较强地抑制H8 细胞的增殖， 其抑制作用呈现时间和剂量依赖性；POD-NLC 和POD 作用72 h 对H8 细胞的抑制率最高分别为95.8%、65.6% ，半数抑制 浓度（IC50 ）分别为0.015、0.13 µg/ml；空白NLC 对H8 细胞的增殖无影响; ③浓度为0.01 µg/ml 的POD-NLC 和POD 分别处 理H8 细胞48 h 后，H8 细胞的凋亡率分别为（88.30±4.28）%和（59.95±3.26）% ；荧光显微镜观察，均出现了核固缩、染色质 高度凝聚、凋亡小体等典型的凋亡形态改变；与空白对照组相比，POD-NLC 组和POD 组G2/M 期细胞比例明显增多，S期 细胞比例无明显变化，G0/G 1期细胞比例明显减少，但两组间细胞周期时相比例的差异无统计学意义（P0.05）。结论 该 制备工艺可行；与POD 相比，POD-NLC 对H8 细胞具有更强的增殖抑制和凋亡诱导效果，可使细胞阻滞于G2/M 期，显示 出良好的抗宫颈HPV 感染的效果。 关键词：鬼臼毒素；纳米结构脂质载体；细胞凋亡；永生化人宫颈上皮细胞 中图分类号：R91 文献标志码：A 文章编号：1673-4254（2011）06-1023-06 Preparation of podophyllotoxin nanostructured lipid carriers and its effects on immortalized human cervical epithelial cells with HPV infection in vitro 1 1 2 2 1 1 CHONG Shu-bin , ZENG Kang , LI Guo-Feng , REN Fei , ZHU Xiao-liang , ZHOU Jin-jie 1 2 Department of Dermatology, Department of Pha