丙型肝炎病毒NS5a区血清型特异性多肽的选择与应用性研究.pdfVIP

无关。此外，本组资料还显示，伊曲康唑治疗中肝损害的潜伏期长短不一(5天一6周)，与剂量大小、 疗程长短无密切相关性。 在伊曲康唑注射液治疗过程中，无论治疗前有肝功能异常．或治疗中出现肝功能异常，绝大多数患 者都继续使用，个别患者所应用时间甚至超出常规要求，最长达42d，并未出现更为明显的肝损害，甚 至肝功能明显好转，与文献报道相一致。更值得一提的是，本组6例严重肝病患者(2例慢性重型肝 炎、4例肝炎肝硬化失代偿期)，其肝脏功能已经处于失代偿状态，存在严重的代谢异常，此时更易出 现药物性肝损害，但在积极的保肝等治疗及肝功能密切监测下，应用伊曲康唑注射液治疗后，4例并无 肝损害的进一步加重，提示该药物无明显毒性作用，或与采取积极的预防性保肝药物治疗有关。而另2 例有肝损害明显加重者，1例经病理汪实与原发肝脏基础疾病密切相关，与伊曲康唑无关；1例仅应用 3d后出现肝损害加重，与基础疾病关系密切。与伊曲康唑无关。 本研究提示伊曲康唑治疗过程中出现肝功能异常可能存在以下几种因素：①与肝脏基础疾病有关： 肝脏在原有疾病的病理状态下，不仅可影响药物在体内的代谢过程，引起药物性肝病，而且可在原发病 的基础上加重肝损害。我国为乙型肝炎的高发地区，在原有慢性肝病的基础上更易发生药物性肝损害。 ②与继发细菌、真菌感染有关：严重感染可引起包括肝脏功能损害在内的多器官功能障碍；③与治疗前 后其他损肝药物联合应用有关：如抗结核药物、两性霉素B等；④与伊曲康唑直接或间接相关：如酶 代谢改变，使其他损肝药物肝代谢改变，或仅对部分患者有轻度毒性作用，但在积极保肝治疗下可避免 其发生。 总之，在伊曲康唑治疗过程中确实存在一定程度的肝功能异常，其发生与剂量等因素无确切的相关 性，而与治疗前就有肝功能异常的肝脏基础疾病密切相关。因此，在应用过程中应动态随访肝功能，特 别是联合应用其他损肝药物或有肝病基础患者，更应积极保肝治疗。 A16．丙型肝炎病毒NS5a区血清型特异性多肽的 选择及应用性研究 中国医科大学附属盛京医院感染病科(110004)窦晓光张琳李智伟冯国和 CentersforDiseaseControlandPrevention，Atlanta，CA，USAH．A．Fields Y．E．Khudyakov 前已有3代HCV抗体检测试剂盒，其抗原来自结构区和非结构区。每一代的试剂盒的抗原性都有明显 白抗原，其对于HCV感染早期的患者和感染基因2和3型病毒者．其敏感性仍然有限。此外，抗NS5 抗体的检出率明显低于抗C22和抗C33抗体的检出率。因此挑选出NS5高免疫源取非常重要。已经通过 人工合成的多肽发现了几个高免疫源去，并已证实了该区存在线性抗原区。 应用人工合成的多肽检测抗HLT抗体的敏感性和特异性均比应用重组但自检测方法高。因此，在 第2和第3代试剂盒中用来自核心和NS4区的多肽代替了蛋白质。另一方面，病毒的基因分型可以代表 HCV的地区分布并有重要的l临床意义。许多研究已证明，HLT?的基因型与干扰素疗效密切相关。因 此，治疗前应常规检测HCV基因型。目前基因分型的方法包括特异引物扩增后直接序列分析、特异探 针PCR、限制性片断长度酶切分析。尽管这些方法的特异性和敏感性较高，但相对较贵，且标本需要特 RNA阳性的标本。最近越来越多的血清分型的方法用于临床检测， 殊处理和保存，且仅仅是用于HCV 尤其适用于HCVRNA阴性的患者。来自NS4区的基因型特异性多肽已用于临床上监测基因型特异性抗 体。 一106一 材料与方法 因分型为PCR产物直接测序法或RFLP法。加份已确诊的慢性丙型肝炎患者的血清作为血清分型的待测 血清。 2．多肽合成：从C,oleBank中检索到45个来自不同基因型且序列不同的HCVNSSa高免疫源区(氨 设计并合成了305个序列不同的多肽，每一个多肽长为30一lner。相互之间有15个氨基酸相重叠。 3．酶免疫检测：将人工合成的多肽溶解在0．01M的PBS缓冲液中，然后以每孔lpg的浓度包被到 倍的稀释。同时用40份抗一HCV阴性血清作阴性对照。 用扩增的5’frill区产物序列分析。 结 果 基因型中有相