拟用于神经干细胞移植后功能重建评估与鼠脑MEMRI功能成像方法优化研究.pdf

＼_＼燃煳 拟用于神经干细胞移植后功能重建评估的 鼠脑MEMRI功能成像方法优化研究 博士研究生：法志强 指导教师：姜晓丹教授、温志波教授 摘要 研究背景 resonance 本课题的目的是依托磁共振成像(magneticimaging，MRI)检测 stem 技术、为神经干细胞(neuroalcells，NSCs)移植治疗应用的疗效评估提供 活体功能示踪技术方法。 NSCs在神经创伤修复过程中具有重要学术价值，其中骨髓基质细胞来源的 marrowstromacells．derived NSCs(bone NSCs，BMSCs-D．NSCs)，因其来源丰富、 取材方便并可自体移植而不涉及免疫排斥及伦理问题等优势，具有广泛的临床应 用前景。本研究团队在BMSCs．D-NSCs诱导分化及移植应用研究方面取得了乐观 的前期实验结果，为迸一步研究NSCs移植修复神经组织损伤的机制，还需要在细 胞移植后的一定时间点对所移植NSCs在体内的功能情况进行评估。 但迄今为止的各项技术(包括活体脑片膜片钳技术等)，均未在研究NSCs移植 后、于宿主脑内的功能评估方面获得突破；对于所移植细胞是否可与活体神经组织 发生功能重组并发挥相关的功能尚无从确定。然而，BMSCs．D．NSCs活体内功能的 nerve 鉴定和评估对于其移植治疗中枢神经系统(central system,CNS)损伤修复策 略的实施应用至关重要。根据本团队相关前期研究工作结果及前述内容的文献搜索， 无论从形态结构、还是神经电生理神经生化的角度，都显示了NSCs在体外的确具备 神经元样细胞分化的能力；近期发展起来并成为研究领域热切关注的诱导性多能干 细胞(induced stem cells，iPS)技术，也从另一个侧面提示了干细胞(包 pluripotent 括NSCs)向神经元方向发育分化并拥有相关神经元功能的确定性。这些前期工作的 发现，都为我们进～步从事BMSCs-D-NSCs移植后的体内功能评估研究提供了有利 中文摘要 依据，目前所需要的是一种更有效、更能直接活体评估移植NSCs在宿主体内功能重 建的示踪方法。 fluorescence ～般情况下，体外标记追踪方面，通常用绿荧光蛋ft(green protein, 的追踪观察仅适用于体外分析或动物实验，而就NSCs活体内的分化及功能评估或 未来临床疗效评估而言，探寻能直接评价移植NSCs在宿主体内功能重建的活性 示踪方法更加重要。 在从结构上活体示踪移植干细胞的存活迁移研究方面，国外曾有借用超顺 iron oxide，SPIO)活体标记移植细胞修复心肌缺 磁氧化铁(Superparamagnetic 损评价的研究报道；本实验室则较早借助于SPIO活体标记手段对 但这些标记物结合影像学活体示踪的内容还仅是从结构上追踪移植细胞的存 活、迁移，无法从功能上追踪移植细胞在宿主神经组织内的功能状态。 在从功能上活体评估和示踪移植干细胞与宿主组织功能整合与功效研究方面， emission 子发射体层摄影(position resonance oxygenlevel-dependent，BOLD)磁共振(magneticimaging，MRI)成 像方法只可提供区域脑组织活动