趋化因子SDF-1和MCP-1在心肌梗死后骨髓间质干细胞归巢中作用与实验研究.pdf

趋化因子SDF．1和MCP．1在心肌梗死后骨髓间质千细胞归巢中作用的实验研究 摘要 趋化因子SDF-1和MCP-1在,6R11．梗死后 骨髓间质干细胞归巢中作用的实验研究 摘 要 第一部分：MI大鼠心肌组织中SDF．1与MCP一1的动态变化及意义 目的： 有研究提示移植后的骨髓干细胞可以植入到心肌梗死周围区域中，而细胞因子单 chemotactic 核细胞趋化蛋白-l(monocyteprotein1，MCP—1)及基质细胞衍生因子．1 (stromalcell．derivedfactor 1，SDF．1)可能对干细胞具有趋化作用。移植干细胞植入 到心肌梗死和／或周围区域的现象是否与心肌梗死后细胞因子水平和分布存在联系尚 infarction， 不十分明确。本研究结扎大鼠冠状动脉左前降支建立心肌梗死(myocardial 达的动态变化及其意义。 方法： 以原位杂交及免疫组化方法检测大鼠心肌梗死前及梗死后1、2、4、7、14、28、 56天梗死中心区域、梗死周围区域及无梗死正常区域SDF．1、MCP．1mRNA及其蛋 白的表达情况；同时建立单纯开胸假手术对照组，于术后l、2、4、7、14、28、56d 以同样方法检测SDF．1、MCP。1rnRNA及蛋白的表达情况。 结果： 心肌梗死大鼠中：梗死中心区域MCP．1于心肌梗死后第ld升高，第2d达峰值， 至第14d渐降至正常水平；梗死周围区域MCP．1心肌梗死后第1天升高，7天达峰 值，至第28天恢复正常水平；梗死中心区域及周围区域SDF．1均于心肌梗死后第1 天升高并达峰值，至第14天渐恢复至正常水平；无梗死正常区域中MCP．1、SDF．1 的表达在正常水平，且不随时间改变而改变。假手术非梗死组大鼠心肌中MCP．1、 SDF．1的表达在正常水平，且不随时间改变而改变。MCP．1、SDF．1rnRNA与蛋白的 表达变化趋势相一致。 趋化因子SDF．1和MCP．1在心肌梗死后骨髓间质千细胞归巢中作用的实验研究 摘要 结论： 心肌梗死后早期梗死中心及周围区域SDF．1、MCP．1表达水平升高；根据梗死中 心区和周围区域细胞因子SDF．1、MCP．1表达的动态变化情况选择治疗时间窗，可能 有助于趋化更多的干细胞到达损伤部位，提高治疗效果，可能对心肌梗死后组织修复 产生影响。 关键词：心肌梗死、时间窗、SDF．1、MCP．1 第二部分：SDF．1与MCP．1对骨髓间质干细胞归巢到 急性梗死心肌中作用的研究 目的： 的促进作用。但内源性的SDF．1、MCP．1表达时段短、表达水平低，与心肌梗死后超 急性期炎症反应的时间窗重叠，可使趋化作用受到限制。本研究通过外源性的SDF．1、 肌中的作用。 方法： 细胞培养采用健康F344大鼠麻醉后取双下肢股骨后处死，股骨移入超净台内， 咬骨钳咬碎股骨，以IMDM培养基冲洗髓腔获取骨髓干细胞。采用全骨髓培养法培 养扩增，利用MSCs贴附于塑料培养皿的特点，在传代增殖过程中通过换液逐渐去除 造血系细胞等杂质细胞。经21--28天培养，约传代3~4代的细胞即可用于移植。细胞 移植前予以含10llmol／LBrdU的培养基孵育24小时进行细胞标记。 近交系F344大鼠随机分为5组，其中4组为心肌梗死大鼠，1组为正常大鼠。 ventricularfraction， 大鼠心肌梗死模型建立前行超声心动图检查心功能(1eft ejection ventricularfractional LVEF；left 心动图检查心功能，然后3组梗死大鼠在心肌梗死区及其周围注射外源性MCP．1、 进行对照，正常大鼠也于相应部位注射等量的生理盐水进行对照。随后所有大鼠经尾