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第十届全国化学传感器学术会议论文摘要集 B生物传感器
B1
8基于非标记DNA核酸适体的
高灵敏IgE荧光传感器检测研究
何婧琳，吴再生，张松柏，沈国励，俞汝勤+
0082)
(湖南大学化学化工学院，化学生物传感与计量学国家重点实验室，长沙41
aptamer序列互补，
号增强．另外一条标记了dabcyl猝灭基团的短链DNA(Q-DNA)与紧挨T-DNA结合位点的IgE
mol·L．1．
以降低背景荧光。IgE能够被检测到的线性范围是9．2xi0‘1到3．7x10一m01．L-1，检测下限是5．7x10。1
基于核酸的蛋白质检测是一个非常有前途的领域，在分子生物工艺学中不仅可以迅速而准确
地鉴定生物物种还可以对某些疾病进行有效诊断。卜3仅存于哺乳动物体内的免疫球蛋白E(IgE)
在免疫反应中起到关键性的作用。快速检测IgE可以为与过敏症相关的疾病诊断提供依据。我们
该体系不但灵敏度高，操作也十分简单。
1．实验部分
1．1荧光传感器的设计
IgE的aptamer未经任何
修饰，其序列如下：5-GGGG
”…
b粤善
CACG1YITATCCGTCCC ；麟
TCCTAGTGGCGTGCCCC。
德克萨斯红修饰的短链 一公移边础Q-DNA
DNA(T-DNA)和dabcyl修饰 Fl础uorescence-on蔷
1．Schematicoftheinteractionbetween
的短链DNA(Q．DNA)紧挨着Figure IgE(theellipse)and
an withaTexas
unmodified
aptamer(thelongwavybond)together
与aptamer互补。所有的DNA short with
DNA(T-DNA．thewavybong rotundity
red—contmmng
a short
markedand DNA(Q—DNA，the
和IgE都溶解在pH7．4的磷酸 D dabcyl—containing wavy
with marked
bong rotundityQ)．
mM
缓冲溶液(8．1 Na2HP04，
1。1mM mM mM 138mM
KH2P04，1 KCI，and NaCl)中。检测液的成份与缓冲液的成份
MgCl2，2．7
基本相同，只是加大了NaCI的浓度(350raM)。200m
plQ
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