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中国摩擘通报 第23卷增刊2007年8月
http：llwww．casb．org．cn
·225·
淮南地区土壤氨氧化细菌群落组成研究
杜晓光
(淮南师范学院化学生物系，安徽淮南232001)
摘要：本实验采用琼脂糖凝胶电泳法研究淮南地区土壤氨tR．4e匕细菌群落组成．将提取的土壤DNA溶液经过纯化、PCR
法．Edgcomb改进法和Tsai报道法3种方法．比较电泳条带发现，Tsai报道法提取效果最好．
关键词：土壤；硝化活性；氨氧化细菌；琼脂糖凝胶电泳
Abstract：The themethodofgelose to theformofammonia
experimentaladopts gelelectrophoresisstudy
inthesoilinHuainan．After andPCR ofthe
bacteria solutionofDNAcollectedfrom
oxidizing purificationexpansion
thesuiland ofDNAinfour ofammonia isaconclusionthatthesoil
bacteria，there
electrophoresis generics oxidizing
containsNitrosomonasand Nitrososira．TocollectDNAfrom
mainly Nitrosococcus．without soil．therearethree
methods：SDSsalt hasthe
high extration，Edgcombimprovement．Tsai
reportment．Aftercomparision。Tsaireportment
besteffect．
words：soil；nitrification
Key activity；ammoniaoxidizingbacteria；gelosegelelectrophoresis
土壤是微生物活动的最适宜环境和自然界微生 l材料和方法
物聚集最多的地方。土壤微生物中主要有细菌、放线 1．1士壤样品：取自淮南周边耕她袁层土壤面(0—20锄)．
菌和真菌三大类，其中细菌的种类和数量最多，它们 1．2方法
通过分解有机残体，代谢产生有机酸，分泌体外酶来 1．2．1土壤DNA提取：方法ISDS高盐提取法16J：
促进土壤中物质的分解和合成，在土壤系统中起着举
足轻重的作用。硝化细菌是土壤氮循环中起重要作用
的微生物类群之一，它的硝化作用影响环境中NH·+
和NOr水平IIUl以及农田土壤的肥力水平II制，耕作土 离心收集上清，重复上述操作两次，合并上清，酚氯
中的硝化细菌数量及硝化强度被认为是衡量土壤肥 仿抽提，乙醇沉淀，用1001aL无菌水溶解。方法Ⅱ
力的指标¨J，研究土壤的硝化作用具有重要的农学意 Edgcomb改进法I，1：取lg土壤，加入PBS，225r／min、
5mol／L
义和环境意义。硝化作用由两步组成，分别由氨氧化
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