诱导剂对工程菌表达重组目的蛋白的影响.docVIP

诱导剂对工程菌表达重组目的蛋白的影响 摘 要： 观察诱导剂对工程菌发酵及重组目的蛋白表达的影响，从而选取最佳诱导表达条件。本文主要阐述了几种诱导剂对工程菌发酵菌体密度以及重组目的蛋白表达量的影响，分析了不同诱导剂诱导表达重组蛋白的特点及存在的问题。同时着重介绍了阿拉伯糖做为诱导剂对重组目的蛋白表达量的影响，研究得到工程菌发酵的最优条件，为阿拉伯糖作为诱导剂最终应用于重组基因工程药物的工业化生产提供了有益的参考和借鉴。 关键词： IPTG ; 乳糖；阿拉伯糖；诱导；发酵 近年来，重组大肠杆菌的高密度发酵是现代基因工程产品大规模生产的重要技术。采用高密度发酵技术，提高菌体的发酵技术，提高菌体的发酵密度，最终提高产物的比生产率，不仅可以减少培养体积、优化下游分离提取，还可以缩短生产周期、降低生产成本，从而极大地提高在市场上的竞争力。然而在研究高效发酵过程中，人们往往会遇到表达效率难以得到最大限度的提高与产率较低等问题。在众多影响因素中，诱导剂对于外源基因高效、稳定的表达起着非常重要的作用。由于Lac 启动子是使用最早、研究最详细的启动子之一，所以目前用于诱导重组蛋白表达的诱导剂主要是IPTG和乳糖，而对阿拉伯糖诱导重组蛋白表达的研究尚少。但有文献报道,Lac 启动子的控制很不严密,在无诱导剂IPTG的情况下可有较高的表达。而阿拉伯糖(Ara)启动子是一个控制较严密且具较高表达水平的启动子