乳移平对TA+Ⅱ号小鼠移植瘤生长与肺转移影响的研究.pdfVIP

II号小鼠移植瘤生长及肺转移影晌的研究 乳移平对TA 上海中医药大学附属龙华医院乳腺科刘胜花永强孙霭平谭松 乳移平为上海中医药大学附属龙华医院陆德铭教授、刘胜教授根据多年的临床经验总结出来的以散结 解毒为治则的抑制乳腺癌术后复发转移的有效方剂，本实验拟通过观察乳移平对TAII小鼠乳腺癌移植瘤模 型的抑瘤抗转移效果。并以与乳腺癌转移中细胞外基质(extracellular metallo Inhibitor 基质金属蛋白酶-9(matrix of 实验依据。 1 实验材料及方法 L1实验材料 1．1．1实验动物和细胞株津白II号(TA2)小鼠，普通级，体重20_+2g，雌性，6—8周龄，天津医科 大学实验动物部提供，动物号：津医动字第008号，饲养于中国科学院上海生命科学研究院。MA-891小鼠 乳腺癌细胞株原为一只348日龄雌性津白II型小鼠自发乳腺肿瘤，经同源雌性小鼠反复传代，获得高自 发肺转移模型，病理证实为小鼠乳腺癌，Dunn类B型。由中国医学科学院肿瘤研究所病理实验室罗利群教 Cruz公司，稀释度为l：50， 授提供…。1．1．2主要实验试剂RMP-9和TI肝一1抗体，购自美国Santa 货号SC-1877：FVⅡI-RA，购自美国Dako公司公司，稀释度为h 号：ARl022。 1．2实验方法 组、环磷酰胺组和生理盐水组，每组12只．并开始给药。 由上海中医药大学附属龙华医院中药制剂室制备；环磷酰胺，江苏恒瑞医药股份有限公司生产，批号： 周连续给药5日，停药2日，环磷酰胺每日一次肌注0．Iml，每周给药三次，生理盐水给药方法同中药组， 共给药4周。 1．2．3实验标本取材称量体重后脱颈处死小鼠，无菌条件下摘除肿瘤，剔除筋膜，用电子天平称重并 在固定液(饱和苦味酸：甲醛：冰醋酸=75：25：5)中固定24小时后用无水乙醇浸泡至肺组织颜色恢复， 在解剖显微镜下计数全肺转移结节数目并记录。 2观察指标及统计处理 ×100％。 108 2．2肺转移结节数及肺转移抑制率肺转移抑制率(％)=(生理盐水组平均肺转移结节数一药物组平均肺转 移结节数)／tt理盐水组平均肺转移结节数×100％。 2．3免疫组化法检测瘤组织I嘲P-9和TIMP-I蛋白的表达(Envision法)从各组肿瘤组织石蜡切片中随 机选3张进行改良ABC免疫酶标记法检测，测定方法按照产品说明书进行操作。在100倍显微镜下每张切 片随机选取2个视野，利用免疫组化定量分析软件进行图像分析，测定各组在统一光度下阳性细胞的面积 for 2．4统计方法各组数值均采用均数±标准差(X±S)表示，采用SPSSl2．0Windows统计软件进行 3 结果 3．1瘤重及瘤重抑制率 ． 的62．11％。见表l。 注：与生理盐水组比较，木只O．05，料尺O．01；与环磷酰胺组比较，A尺0．05 3．2肺转移结节数及肺转移抑制率 乳移平组肺转移节结均数为7个，明显低于生理盐水组，两者差异有显著统计学意义(P0．01)，高 的45．86％。见表2。 表2各组肺转移结节数及肺转移抑制率的比较 注：与生理盐水组比较，宰只O．05，木木尸O．01；与环磷酰胺组比较，△只O．05 3．3各组肿瘤组织船坞蛋白表达的比较 之间的差异无统计学意义(P0．05)，说明乳移平可以降低肿瘤组织删P一9蛋白的表达。见表3。 ● ’ 表3各组肿瘤组织MMP-9蛋白表达的比较 组别