头颅半约束非撞击旋转暴力致猫脑DAI病理研究.pdfVIP

生旦堡盟逝垒塑墅皇}叠医蛭佥盒=蔓三丛垒垦丛垂盔垒垂塞垂堡 29· r,aspase一3和caspase一8的活性，减少细胞揭亡，起到神经保护和治疗作用。 性，减少细胞凋亡，起到脑保护作用。这与Kurm-al等报道在大鼠颅脑创伤后应用EPO可以下调促凋亡 基因的表达，明显减少神经细胞凋亡，发挥脑保护作用相一致。另外蝴latt等研究发现脑创伤后缺 氧可以刺激神经元、神经胶质细胞和血管内皮细胞产生并分泌EPO。因为EPO在红细胞生成时发挥重 要作用，其含量增加可以刺激骨髓的造血干细胞向红细胞分化，间接提高脑组织氧供应，改善缺氧状 态，有利于缺血半暗带的发生可逆性损害的细胞恢复功能，从而减轻继发性脑损害。这可能是EPO发 挥脑保护作用的又一机制。 本实验亦发现颅脑创伤合并休克后脑组织含水量较假手术组显著增高，r—HuEPO治疗组脑含水 量较模型组虽有下降，但差异无统计学意义。考虑脑水肿是颅脑刨伤后重要的继发性病理改变，可能 与脑创伤后细胞凋亡、能量代谢障碍、钙离子超载，氧自由基生成及兴奋性神经毒性物质释放增加等众 多因素有关。r—HuEPO虽可抑制Caspase一3活性，减少细胞凋亡，间接提高脑组织氧供应，改善缺氧 状态，但只是抑制了脑水肿发生的邦分原因，所以脑水肿改善不明显。 尽管如此，r．HuEPO对于颅脑创伤仍有治疗作用，但大剂量长期应用可引起红细胞增多症、血栓 形成等副作用，我们仍需进一步研究其治疗剂量及时间窗，为临床治疗提供理论依据。 参考文献(略) 头颅半约束非撞击旋转暴力 致猫脑DAI的病理研究 陈革陆华周建宏周小金冯淑静吴小龙卢咏患 在临床上，弥漫性轴索损伤(Diffusedaxonal两my，DAI)是以原发性昏迷时间长而又缺乏神经定 位体征为其临床特征的一组原发性脑损伤，病理尸解特点是脑白质广泛性轴索损伤及胼胝体、基底 节区、脑干等近脑中线部位局灶性病损。近年生物力学研究表明，旋转加速暴力特别是旋转减速暴 力使应力易向颅底和大脑镰小脑幕传递，在颅底、大脑镰、小脑幕与邻近的脑结构间产生剪应力，这 些结构正是白质纤维集中的肼胝体、内囊、脑于。显然，人类DAI损伤轴索的分布与人特有的坚硬 的硬脑膜、小脑幕结构密切相关。灵长类动物有类似人类的大脑镰和小脑幕，已较成功地复制出类 似人类的DAI，但成本高。猫小脑幕为骨片样结构，可模拟人的坚硬的小脑幕，故本实验采用头颅 半约束非撞击旋转暴力致伤装置致伤猫，观察损伤轴索的病理变化及其分布，探讨DAI的发生机 理。 资料与方法 1．致伤方法：采用头颅半约束非撞击三维旋转加速致伤装置，设定致伤条件为，重锤3ks，高度3m， 头颅水平面转动80％，垂直面45℃。选用家养4—6个月龄杂种雄性猫10只，体重1．5～2．0kg，损伤组 8只，对照组2只。用质量浓度为50r：,／L的氯胺酮以20,叫kg腹腔注射麻醉，将猫置于动物箱架上固定 作者单位：214041无铬市第三人民医院神经外科(陈革、陆华、周建宏)，宴验室(周小金、冯淑静，吴小龙、卢咏軎) ·30 生旦匿堑垃垒翌量皇瞪医盟壁垒=塑三厦垒星岱盔连垒丝塞垂蕴 躯干，头放人头颅箍内，螺丝固定，待麻醉变浅，当出现耳翼反射、角膜反射或挣扎有叫声时释放重锤致 NTEMWCRASCC3 1997版分析软件处理数据。 2．神经功能测试：观察耳翼反射、角膜反射、四肢屈曲反射抑制时间，以自发睁眼、抬头翻正反应出 现作为昏迷结束判断标准。 3．病理检查：在伤后72h，用质量浓度为30∥L的戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，颈总动脉插管，断离对 整取出，同种固定液固定1周，修去脑干两侧脑组织，以每5mm与脑中轴线平行从右自左矢状切开，在 小脑上脚处横断脑干，3009／L蔗糖PBS浸泡至组织块下沉，同一矢状面的两组织块对应以25tan连续冰 冻切片，每间隔9张切片留取1张，备做NF68免疫组化检测，留取相邻切片备做NI％8免疫组化标记轴 索球超薄切片及HE常规染色。 4．NF68免疫组化染色：切片用体积分数2％H2吨／25％冰乙酸／50％甲醇磷酸盐缓冲液封闭内源性 置37℃水浴箱1h，山羊抗生物素蛋白+生物素化辣根过氧化物酶+0．Olmol／LPBS(I：I：100)37℃孵育 1h，二氨基联苯胺(DAB)+H，O显色，脱水、透明、封片。 5．NF68免疫组化定位透射电镜：同上述方法封闭切片内源性辣根过氧化物酶