RNA干扰技术沉默Livin基因联合顺铂对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响.pdfVIP

于利利等 　RNA 干扰技术沉默 L ivin基因联合顺铂对宫颈癌 H ela细胞凋亡的影响　第 23期 ·3307 · RNA 干扰技术沉默 L ivin基因联合顺铂对宫颈癌 Hela细胞凋亡的影响 ( ) 于利利 　王泽华 　华中科技大学同济医学院附属协和医院妇产科 湖北 　武汉 　430022 中国图书分类号 　R73731　　文献标识码 　A 　　文章编号 ( 2009) 23 330703 【摘 　要 】　目的: 采用 RNA 干扰技术阻断 L ivin基因的表达 , 并加入不同浓度的顺铂 , 研究其抑制 H ela细胞 L ivin基因的 效果及增强顺铂诱导宫颈癌细胞凋亡的效应 。方法 : 采用脂质体转染法将 p Genesil - 1 - B IRC7 1、p Genesil - 1 - B IRC72、p Gene sil - 1 - HK转染宫颈癌 H ela细胞 , 采用荧光定量 R T - PCR、W e stern - b lot检测转染前后宫颈癌 H ela细胞 L ivin基因 mRNA 和蛋白 ( μ μ μ ) ( ) 表达的变化 , 并加入不同浓度的顺铂 3 g/m l、6 g/m l、99 g/m l , 采用流式细胞术检测不同时间 24 h、48 h 的细胞凋 亡率 。结果 : 转染 p Gene sil - 1 - B IRC71、p Gene sil - 1 - B IRC72后 H ela细胞中 L ivin mRNA 拷贝数明显减少 , 蛋白质表达水平显 ( μ 著降低 ; 流式细胞术检测 24h、48h凋亡率 , 干扰组细胞显著高于对照组 , 并随时间延长凋亡率增加 ; 加入顺铂 3 g/m l、6 μ μ ) ( ) g/m l、99 g/m l 后流式细胞术检测 24 h、48 h凋亡率升高 , 差异有统计学意义 P 005 , 呈时间及剂量依赖性 。结论 : 以 L ivin基因为靶向的 RNA 干扰技术可有效地抑制宫颈癌 H ela细胞的 L ivin基因表达 , 并可增强顺铂诱导凋亡的效应 , 且具有时 间和剂量依赖性 。 【关键词 】　L ivin　shRNA 　p Genesil - 1　H ela细胞 　顺铂 Effect of RNA in terference com b ined w ith c ispla tin on silenc ing expression of L iv in gene and the apoptosis of Hela cells YU L i - L i, WAN G Z e - H ua D ep a rtm en t of O bs tetrics and