磁性纳米粒子标记探针在流动注射化学发光DNA杂交分析中的应用.pdfVIP

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2017-08-20 发布于安徽
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磁性纳米粒子标记探针在流动注射化学发光DNA杂交分析中的应用.pdf

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第37眷 n析化学(FEIfⅪHUAXLrE) 镕W 2009《10月 chine∞Journal ofAnalyticalch哪isW 磁性纳米粒子标记探针在流动注射化学发光 DNA杂交分析中的应用毕赛周宏张书圣‘ 青岛科技大学化学％．4悫nI．教仃都t^实验≈，肯岛266042 纳米粒子作为生物^分f标记物已Jl泛应用丁生化分忻领域，其{一磁性纳米粒f由十表mJ秘大、易r分离等优点，成为倒内外研究热点。磁性纳米车c!r城…可修饰功能基埘．进『n】结合蛋n 质或DNA等生物活性物质，阳此常用作【扎崩载体，尢细胞分离、蛋口质纯化、免疫学及微乍物学检Ⅻ0等^I^】均取得了较人的进胜。口前，根少有报道将磁性纳米粒f作为标记物应用于q讹分析。奉研究采用流动注射化学艇光分析技术．结合DNA生物条形码技术，建立r一种磁件纳米粒，标记探针的商灵敏度、高选择忡的新型化学发光DNA,杂交分析方泣，实现了对特定DNA序列的定量榆测和选择性识别。 660C电化学分析(上海辰牛仪器』)；JEOLJSM 仪(中幽科学院生物物理研究所)．CHI 6700F透射 50 电丁显微镜(TEMkCary H直公一d】；鲁米{菪(Lumin“，卣必戚化学试剂公司)：硫酸铁(Ⅲ)铵(凡律市耀牛化学试剂自策植苷酸(』匕柬赛一盛公司)。如HlA所示，咀控摹修饰磁性纳米粒于作为标记物，将儿桥记于眄种3’端氨萆修饰DNA(伊DNA和bbc．DNA) ¨段上，形成bbe—p-DNA．MNPs标记探引，其中D．DNA作为探针与tDNA朵史，bbc．DNA为生物条形码，以减少交叉反应。将3’端琉幕修饰DNA固定于金电极表面，先后苫阜占—产量{卜幽。。觏最：加^．tDNA和bbc-P-DNA-MNPs进行“三明治”结构的杂交反应。基t磁性纳米粒了溶解产物Fe”对lumin01．H202 化学发光体系的催化作用，对特定序列的DNA片段进行毫$沓一定量椅捌。脚fB为lumin01．H202．＆’流动注射化学发光Figl m}Schemahc ofCL rq≈一bnon 分析流程蚓。 detec80aofDNA叶bndnahonbasedon bishop-codefuncbon“口ed m掣etlC 实验结粜柱明，存优化实验条什r，测定tDNA的线1，l!范围为L0x10“’圳10 10_。4moUL，检出限为032 n洲口amcIclabels：f1311i4SLdettxtion sysl锄fordet—tionoffr fmol／L，方法的线性同归古样为1=125410C+31750，艟|关系数，=0 x10”mol／L R％ 9988。对4．0 tDNA进行11次平行测止的柑对标HE偏差为2 Refcrcnce‘ 1 Bi SChum 154704-4709 E¨￡，，2009 S，‰YMY柏gX■蛐S 2 BiSZhouII S 2009、242961～2966 zhlg S日一BⅢ／ectro 3 SSm…月1w胁nn 24M一24