基于硒氮、硒磷功能键的新型荧光探针及其在细胞成像中的应用.pdfVIP

瓣}目 ～捌譬躐。～。， ∞涮 基于硒氮、硒磷功能键的新型荧光探针 及其在细胞成像中的应用 龚维，邢艳璁，尹伶灵，丁白瑜，唐波‘ 山东师范大学教育部分子与纳米探针重点实验室，济南Z舶014 摘要：硒元素具有重要的生物学作用 本文主要介绍本课题组近几年基于硒 氩、硒磷耐能键所发展的新型荧光探针 并成功实现T对活细胞中硫醇、隶离 子的成像分析。 关犍词：荧光探针；硒氟硒磷键；激光其聚焦显擞成像 近芷来，对细胞中生物活性物质的检测受到 内荧光成像。 了广泛关洼，荧光幢测法不仅简便易行，灵敏度 1台有磺氯功能犍的黄光探针 高，选掸性好，还可以在不破坏生物活性的情况 1 1以罗丹明6G为母体的硒氮荧光探针 下进^细胞。利用激光共聚焦显微成像技术对待 我们设计合成以罗丹明6c为母体含有硒氟 测物进行呵视化成像分析．实现了生命体中生物 键的新型荧光探针(Rh．昏)。。具有强亲棱作用的 活性物质“原位可见”。有机硒在生物体抗氧化1、 硫醇类物质能够使硒氯键断裂．恢复罗丹明6G的 抗毒性：等方面具有重要作用。由此．本课题组设 强荧光，达到对硫醇樊物质检测的目的．并在 计合成音有硒氨、硒磷功能键的新型荧光探针， 分别实现对生物体中硫醇、汞离子的检测及细臆 内实现了撤光共聚焦成像(豳1)， 田t hL-n02(人正常肝蛔胞)和H瓣(^肝癌日胞)盘光共聚薰戚像 0 30mn+(c ^Ⅲ常肝目咆m50脚vL探针孵育(3)15r／．(b)如ran；^肝癌目胞用050坤肌探针孵育(d)15¨n(el ，flay别代表(b)(e)田像的明场。蛳目孵育在℃古5％氧化磷的培养箱中进行。圉中标尺为∞岬 】2以罗丹明110为母体的硒氮荧光探针 (图2)。 实验以罗丹明t10为荧光团合成了有机硒荧 2台有硒磷功能键的新型荧光探针 光探针Rh．Se-2“。搽针与强亲桉性的硫醇作用， 利用汞离子的强亲硒性质．设汁合成了一种 恢复罗丹明110的开环强荧光结构，并且溶液颜 以荧光豪为荧光团的有机硒荧光探针(FSe-I)’， 色发生显著变化，实现对硫醇定量检测，同时实 实现对汞离子高灵敏度和选择性的检测，并在小 现“裸眼”检测硫醇与非硫醇，进行了在人正常肝 鼠巨噬细胞RAW2647内进行丁汞离子的激光共 细胞和人肝癌细胞内的激光共聚焦成像研究 聚焦荧光成像(图3)。 基盒面目：国家重自基础研究“973“(0∞7c89360∞)、目隶杰m青4基金12m255t83、国家自然科学基金重大研究计 119一 国2 HL7702(人t常肝目胞)和He啦(人肝癌细胞)盘光共聚焦或像 (a一Ⅻ(b)分别为ILU?702细胞m衄细胞月0 【]2目胞用砌5ⅡWm忆孵育30mm．再用05删L操针Rlrs}2孵育5mLn后澈光共聚焦成像的暗场图片 圈匿 围3小鼠E唾细胞R^w2647细胞共聚焦显橄威慷 cnB (a』Pu^W2．647细胞用05删L操针№O∞血CTAB孵育20邮．(b)RAW2*：47细胞用05脚忆探针和O∞mL O 辫育20mm后，用PKS埋冲洗=遍障去多余探针，继续加^lO