应用PCR-SSCP技术研究犬血管性假性血友病(vWF)基因多态性.pdfVIP

ACADEMICSYMPOSlUMOFTHEFOURTHBRANCHASSoClATloNOFSMALlANIMALMEDICINE OFVETERINARYSURGERY．CAAV SIXTEENTHBRANCHASSOCIATION 中国畜牧兽医学会小动物医学分岔第四次学术研讨会中国畜牧兽医学会兽医外科学分会第十六次学术 应用PCR—SSCP技术研究 犬血管性假性血友病(vWF)基因多态性 叶俊华1 张国生2舒邓群2杨前勇1徐黎1 (1 公安部南昌警犬基地，南昌330100 2 江西农业大学动科院。南昌330045) 摘要：(目的)分析五个工作犬品种vWF基因中五个候选区域的多态性f了解vWD基因 频率，为遗传育种、培育出更加优良的警用工作犬奠定基础。(方法)采用PCR—SSCP技术， 对vWF基因中五个候选区域进行基因多态性检测。(结果)PCR—SSCP分析结果表明，五个候 选区域中vWF基因第43内含子5’侧翼区序列具有多态性，并且只在杜伯文犬中发现。表现 为A、G两个等位基因和从、GG、AG三种基因型，vWD基因频率为10％。(结论)经统计 分析结果表明：在试验杜伯文犬中，群体多态信息含量(PIC)为低度多态，PIC为0．1638。 关键词：犬；vWF基因；PCR—SSCP 中图分类号：$813．1文献标识码：T WiLlebrand 在犬类众多的遗传病中，血管性假血友病(von disease，vWD)是比较常见的一种，共 有60种纯种犬与血管性假血友病有关，其中以杜伯文(DobermanPinscher)的发病率最高。研究表明， Willebrand 血管性假血友病的发生取决于血液中血管性假血友病因子(von factor，vwr)的数量和质 分子资料，对犬vWD的进一步研究具有重要意义。 vWF是一种大分子量的多聚体糖蛋白，当机体受到外伤时介导血小板粘附到损伤内皮细胞暴露的 胶原表面形成血小板血栓。一旦vWF基因发生缺损，这种糖蛋白就将缺乏，这使得血小板无法正常的 Al—A2一A3一D4一B1一B2一B3一C1一C2[¨。 mR— 人的vWF基因位于第12号染色体，全长约178kb，由52个外显子和51个内含子组成，vWF NA长约8．7kb，5’端有一230 bp的非翻译区，3’端有一136bp的非翻译区旧1。犬的vwF基因位于 第27号染色体，序列已经被测出，犬的mRNA长约8．8kb，和人的mRNA非常相似，通过比对后可以 发现，犬和人的cDNA序列具有86．8％的同源性¨J。目前国内外对人的vWF基凶研究的比较多，而应 用PCR—SSCP对犬vWF基因的研究尚无相关报道。 本试验以德国牧羊犬、杜伯文犬、罗威纳犬、史宾格犬和马里努阿犬五大品种犬为材料，采用 vWF基因的相关信息，进一步研究犬vW-F的基因型和分子结构，为警犬育种提供重要的参考信息。 1材料和方法 1。1 试验材粹 试验犬为36只德国牧羊犬、35只杜伯文犬、38只罗威纳犬、lo只史宾格犬和13只马里努阿犬共 132只犬。其中德国牧羊犬和罗威纳犬来自公安部南昌警犬基地，杜伯文犬来自公安部沈阳警犬基地， 史宾格犬来自公安部南京警犬基地，马里努阿犬来自公安部昆明警犬基地。试验犬后肢静脉采血。5 71 MEDICINETHE 十六次学术研