应用QTRAPTM串联质谱仪分析和鉴定中药有效成分.pdfVIP

2010年9月第一届环渤海色谱学术交流会(第十九届天津市色谱学术交流会)会报 应用QTRAP删串联质谱仪分析和鉴定 中药有效成分 张克荣 (AB SCIEX北京代表处，北京100027) 中草药成分分析是复杂和困难的一项工作，本文利用QTRAP州质谱仪特有的扫描功能，以 肉苁蓉为例，寻找出中药有效成分鉴定的最佳有效方案。 中草药成分分析是复杂和困难的一项工作，其化学成分是中药发挥药效作用的物质基 础，是实现中药现代化的关键所在。搞清楚中药物质基础有利于揭示中药的作用机制、方剂 的配伍规律，对制订药材种植GAP标准及中药产品质量标准、优化制剂工艺、实现中药现代 化和国际化具有重要意义。 QTRA∥质谱仪是新一代液质联用串联质谱技术，其独特之处在于同时具备了完整的三重 四极杆的质谱特点，以及线性离子阱的功能，在离子阱模式下，QTRAP啷的MS／MS谱的灵敏度 比常规的三重四极杆型高出二个数量级以上，同时还将两者的扫描功能巧妙的结合起来，实 现“串联四极杆一线性离子阱”的迅速切换。通过选择母离子扫描和中性丢失扫描等来发现 中药有效成分组，得到更丰富的MS／MS定性数据。因此，QTRAPl。质谱仪兼有定性和定量分析 的功能，且具有很多特有的“杆一阱”的新型扫描方式，使得QTRAPl。串联质谱仪在中药成分 鉴定分析、药物筛选以及代谢物定性及定量分析、蛋白定量和生物标志物验证等方面发挥巨 大作用。 肉苁蓉(Cistanche)是常用中药之一，肉苁蓉中具有药效的主要化学成分为苯乙醇苷化 合物，本文应用QTRAPTM质谱技术研究了肉苁蓉中苯乙醇苷类成分。 1．试验部分 1．1仪器和试剂 SCIEX 及肉苁蓉70％乙醇提取物为中山大学提供。试验在AB 3200QTRAP埘LC—Ms／MS上完成， del85um2．1*150mm。 液相为岛津公司LC一20A，色谱柱：AtlantiS 2．QTRAP试验方法 苯乙醇苷化合物结构由3部分组成，即咖啡酸、苯乙醇苷元、糖。苯乙醇苷类化合物在 负离子模式下，具有一些独特的碎裂方式和碎片，比如：m／z461，m／z161特征碎片离子； 中性丢失糖m／z162。普通串联质谱难以从复杂中草药体系中发现这类结构化合物，更难于 获得它们的MS／船图谱做结构鉴定。利用QTRAP独特扫描方式，结合其结构特征，我们采用母 离子扫描(Prec)和中性丢失(NL)扫描筛查，并实时切换到离子阱的二级扫描，很好的发 现和鉴定了苯乙醇苷类的化合物，并比较了母离子扫描和中性丢失扫描的灵敏度。 2．1Prec-EP I方法(母离子扫描切换至增强子离子扫描) 通过母离子扫描m／z461，m／z161，如果发现特征的离子，仪器自动切换到增强子离 子扫描，即线性离子阱的高灵敏度子离子扫描，快速得到所有发现离子的高品质MS／惦质谱 图，进行结构鉴定。 NL-EP 2．2 I(中性丢失扫描切换至增强子离子扫描) 266 2010年9月第一届环渤海色谱学术交流会(第十九届天津市色谱学术交流会)会报 通过中性丢失NL162扫描，如果发现特征性的离子，仪器自动切换到增强子离子扫描， 快速得到高品质的MS／MS质谱图，进行结构鉴定。 3结果和讨论 3．1结果 使用QTRAP特有的扫描技术，根据特征性扫描方式Prec和NL去发现苯乙醇苷类化合物， 并实时获得它们的MS／MS质谱图，结合具有相似结构的标准品毛蕊花糖苷(Acteoside)和松果 成分。 图l为具有代表性的苯乙醇苷类成分松果菊苷(Echinacoside)的结构及裂解特征。m／z 135．0为m／z153脱水所得，m／z477．2、m／z461．2分 161的碎片是m／z179脱水得到，m／z 别为m／z 的各种成分的分子量及MS／MS碎片信息见表l。 HO HO 图1松果菊苷(Echin