胆碱能M2受体在心房肌和其相邻大静脉的分布研究.pdfVIP

The4thChina AtrialFibrillatiOn Symposium 胆碱能M2受体在心房肌及其相邻大静脉的分猫研究 赵庆彦黄从新梁锦军王腾谌辉 【摘要】 目的研究M2受体蛋白在犬肺静脉、上腔静脉、心耳和心房的分布情况，提供和探讨迷走神经诱发心 房内折返和房颤的分子基础。 方法30只犬通过迷走神经刺激，根据诱发房颤情况分为房颤组和对照组。迷走神经刺激后，迅速取 出心脏，分离出左右心耳、左右心房、肺静脉和上腔静脉，用Western印记法观察M2受体蛋白在心耳、 心房、肺静脉和上腔静脉的分布。 结果 18只犬诱发出房颤，12只犬未诱发出房颤。房颤组：ME受体蛋白在左心耳、右心耳、左心房的 and1．45 分布明显高于右心房、肺静脉和上腔静脉，而且左右心耳的分布也明显比左心房高(1．88，1．92 VS and0．91 l，0．93 P0．05)；对照组：M2受体蛋白在左心耳、右心耳、左心房的分布也明显高于右 and1．48VS 心房、肺静脉和上腔静脉，但左右心耳和左心房的分布没有明显差异(1．55，1．57 1，0．92 0．93 and P0．05)。 结论M2受体蛋白在心房肌的分布是不均一的，这种不均一可能是迷走神经刺激诱发折返和房颤的分 子基础。心耳的分布明显高于其他部位，心耳可能在迷走神经诱发房颤中有重要作用。而肺静脉和上腔 静脉在迷走性房颤的作用较小。 【关键词l迷走神经；M2受体；心房颤动；犬 迷走神经与房颤的诱发和维持存在明确的关系‘1’2】，近来报道消融肺静脉的异位兴奋灶和迷走神经比 单独消融异位兴奋灶房颤的复发率明显降低‘2|。迷走神经刺激升高极化恢复的离散，与传导阻滞和不完全 折返有关，迷走神经对心房肌的影响是通过其末梢释放的递质乙酰胆碱(Ach)作用于胆碱能M2受体，与 G蛋白结合后激活KACh通道。为了进一步探讨M2受体在心房的分布与折返及其与异位兴奋灶的关系，我们 通过Western-blot检测M2受体蛋白在心房及其相邻大静脉的分布情况。 材料与方法 1实验对象成年杂种犬30只，体重15～2l kg，戊巴比妥钠30mg、kg腹腔麻醉，气管插管，人工通气， 麻醉后左右侧颈部备皮。右侧股静脉以0．9％生理盐水维持静脉通路，采用体表Ⅱ、aVF、aVR导联监测心 电图。 2刺激迷走神经与分组分离左右颈部迷走神经千，切断双侧迷走神经，用刺激电极插入迷走神经靠 将诱发出房颤的犬作为房颤组，未诱发房颤的犬作为对照组。 691论文囊 The4thChina AtrialFibrillation Symposium 3标本收集迷走神经刺激后，迅速开胸取出心脏，分别取左右心耳、左右心房、肺静脉和腔静脉。 Cruz公司；辣根酶标记山羊抗兔的二抗购自P 主要实验材：M2一抗购自Santa 7B型转移电泳仪为北京六一仪器厂。 4 漂洗NC膜4次，每次在室温下振荡15min。③加入一抗浓度(1：200)(且030ulM2+6mlTBST)温育m。④ 二抗)温育1h。⑥再漂洗，摇均4次，每次15min。⑦显色，DAB试剂盒。 5摄像凝胶共聚成份系统进行分析(VL．France，Vilber公司) 6统计学处理实验数据以均数±标准差表示，数据用SPSS软件分析，两组比较采用t检验，多组间 用方差分析统计结果，以P0．05为差异有显著性。 结果 房颤组：M2受体蛋白在左心耳、右心耳、左心房的分布明显高于右心房、肺静脉和上腔静脉(1．88，1．92 and1．45VS and