猪繁殖与呼吸综合征病毒LN%2f09%2fz1株的分离鉴定与遗传变异分析.pdfVIP

猪病专题 01279 综合防治方案采用伊维菌素与阿苯达唑配伍用药，达到了驱灭多种体内外寄生虫的较好效果。 3．2安排合适的驱虫频率和驱虫时间是减轻乃至消灭猪群寄生虫病的关键。疥螨从虫卵到幼虫的发育时 间约为2周，用药后可杀死成虫、幼虫和若虫，但不能杀灭虫卵，药效过后虫卵孵化发育成若虫、幼虫 或成虫，就会造成再次感染；故应在第1次用药结束后的2周内(10-14d)，再次用药，才能较好地解 决疥螨的危害。 3．3饲料投药对猪的采食有一定的影响，该猪场原采用的驱虫方案把每天的驱虫药物全投在早晨第一次 喂料中，有些猪只少食甚至不食，不仅造成饲料和药物浪费，而且影响驱虫效果。新方案将驱虫药物放 在全天的饲料中且连续7天，虽然也有猪只在开始的l一2天少食，但在后面的几天里基本都恢复正常食 欲，从而达到较好的驱虫效果。 3．4驱虫时应及时将粪便清扫并堆积发酵，搞好猪栏、粪尿沟及周围环境的清洁卫生，以防排出的虫体 和虫卵重新感染猪群。 参考文献 111姜占绳。甘善化．规模猪场主要寄生虫病及防治措施．福建畜牧兽医，2009，9(5)：62-64 【21王凤英等．中、小规模猪场寄生虫病综合防治技术．山东畜牧兽医，2010，3(3)：42 DI陈自峰．规模猪场常见寄生虫病防治方案．动物保健，2006，4(4)：12．14 14J胡岩顺．规模猪场常见寄生虫病的危害及药物防控效果．浙江畜牧兽医．2007．2(1)：28．30 猪繁殖与呼吸综合征病毒LN／09／zl株的分离鉴定与遗传变异分析， 周铁忠1¨，高慎阳1，毕聪明1，张利勃1，高丰… (1．辽宁医学院畜牧兽医学院，锦州121001；2．吉捧大学畜牧兽压学院，长春130062) 摘要t本研兜旨在分矗鉴定猪繁殖与与呼吸综合征囊毒地方分鼻株，为辽宁地区试病的分子漉行病学调查与遣传 Nsp2和ORF5基因克隆测序．进行同源性比较及系统发育进化树等分析，结果证明酋毒椿．鼻北美洲型，与2006年以来 圈内的多敖流行变弄,tat传关系及其相近且独立分支，说明导致辽宁地区流行的猪繁殖与呼吸综合瘟的病原属于北芙洲 型PRRSV．而且存在不断变异惹劳，■果提示。PRRSV在辽宁持续存在。有曲要对本地毒椿不断进行分子漉行^学调 叠与遭传变异性的监洲。及时开发适合辽宁省的PRRSV分子检测方法和痰蕾。才能有效控制PRRS的漉行和危害． 关健词lPRRSV；分离薹定；变异分析 ·基金项目：辽宁省农业科技推广项目(2009934)、辽宁省教育厅项目(L2010265) ¨作者简介：周铁忠(1964．)，男。辽宁人，教授．硕导。辽宁医学院畜牧兽医学院副院长，吉林大学畜牧兽医学院在 读博士，研究方向为动物传染病病理机制与防治。E-mail：ztzl818@126．com ¨·通讯作者：高丰，教授．博导，吉林大学畜牧兽医学院副院长．研究方向为动物分子病理学和免疫病理学。 1280囝 2010年学术年会 1材料和方法 1．1试验材料 1．1．1病料 来源于诊断为PRRSV感染阳性的辽宁省某猪场发病的45日龄幼猪，无菌采集脑、肺、脾、淋巴 结和扁桃体病料，编号记录后于-7012超低温冰箱保存。 1．1．2细胞 ATCC HyClone公司，美洲型PRRSV 于辽宁益康生物有限公司。HCV、PPV、PRV、HEV阳性血清来自于吉林大学预防兽医学实验室。 1．1．3主要试剂及试剂盒 RT-PCR 体与菌种DH5ct均购自宝生物工程(大连)有限公司。 1．2方法 1．2．1病料处理 000r／rain离心30 料悬液，反复冻融3次后，经5 rain，上清悬液用0．22¨m微孔滤膜过滤后，．20℃保存 备用。 1．2．2病毒分离培养 天，将培养细胞反复冻融3次，取冻融液lml盲传3-6代，出现典型CPE达70％时收获病毒培养物， 枷℃保存。未出现CPE传5代判为阴性，同时设参考毒株和正常细胞作为对照。 1．2．3电镜形态观察和纯化： 包埋、切片、染色后透射电镜观察。病毒纯化按常规方法进行。 1．2．4病毒TCm卯的测定 在96孔细胞培养板中培养Marc．145细胞，长成单层后，将病毒作lO倍系列稀释，每个稀释度接 录CPE，按Reed-Muench方法计算分离毒株的TCID50。 1工5病毒