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两种不同纯化大鼠胰岛细胞方法的比较.pdf

中国医科大学学报 第41 卷 第2 期 2012 年2 月 108 · · Journal of China Medical University Vol.41 No.2 Feb. 2012 两种不同纯化大鼠胰岛细胞方法的比较 李晓航,张佳林,李乐,康铁利,程颖,石蕊,赵宁,刘永锋 (中国医科大学附属第一医院普通外科教研室,肝胆外科暨器官移植科,沈阳110001) 摘要 目的 比较分析OptiPrep 和Ficoll 两种介质纯化大鼠胰岛细胞的效果。方法 将24 只SD 大鼠随机分成2 组,采用明 尼苏达大学改良方法提取大鼠胰岛细胞,消化分离胰岛细胞后,分别采用不连续密度梯度Ficoll 离心法和OptiPrep 离心法纯化 胰岛细胞,比较纯化后胰岛细胞数量、纯度、存活率及功能,观察OptiPrep 和Ficoll 两种介质对大鼠胰岛细胞纯化效果的影响。 结果 与Ficoll 组相比,OptiPrep 组胰岛细胞的产量(分别为304±13.57 和346±9.09)和纯度(分别为88.25%±2.22%和94.00%± 0.82%)均显著增加(P 0.05);OptiPrep 组与Ficoll 组胰岛细胞的存活率(分别为93.50%±1.29%和91.50%±1.29%)和功能(胰岛 素释放指数分别为3.04±0.05 和3.02±0.06)的差异无统计学意义(P 0.05)。 结论 OptiPrep 法纯化大鼠胰岛细胞比传统的 Ficoll 法更有优势,而且OptiPrep 价格相对便宜,可以作为纯化大鼠胰岛的常规方法。 关键词 胰岛细胞;纯化;分离;大鼠 中图分类号 R587.1 文献标志码 A 文章编号 0258-4646 (2012)02-0108-04 doi CNKI:21-1227/R1125.025 网络出版地址 /kcms/detail/21.1227.R1125.025.html Comparison between Two Methods for Purification of Rat Islets LI Xiao-hang ,ZHANG Jia-lin ,LI Le ,KANG Tie-li ,CHENG Ying,SHI Rui ,ZHAO Ning ,LIU Yong-feng (Department of General Surgery,The First Hospital ,China Medical University,Shenyang 110001,China) Abstract Objective To compare the effects of OptiPrep and Ficoll on the purification of rat islets. Methods Islets were isolated from the pancreata of 24 SD rats by means of modified University of Minnesota′s method. After an successful enzymatic digestion,the digested tissue was randomly purified by Ficoll and OptiPrep. Compared the islet yield,purity ,survival and function between the two groups after pu- rification and the effects of two media on the purification of rat islets. Results Compared with the Ficoll group,yield and purity of islets were significantly higher in the OptiPrep group (304±13.57 vs 346±9.09 ;88.25% ± 2.22% vs 94.00% ± 0.82% ,P 0.05);there were no signif

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