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钙结合蛋白和碳酸钙相互作用的光谱研究.pdf

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第26卷,第7期 光谱学与光谱分析 V01.26,No.7,pp247—248 2006年7月 and SpectroscopySpectralAnalysis July,2005 钙结合蛋白与碳酸钙相互作用的光谱研究 杨媛凤,姚成立,沈玉华,杨永梅,谢安建+ 安徽大学化学化工学院.安徽台肥230039 摘要钙盐是各种类型结石的主要成分之一,与基质蛋白一起在结石的形成过程中起到了重要的作用。 为探讨蛋白与钙盐的相互作用,文章采用体外模拟实验法研究了钙结合蛋白(CBP中形成的碳酸钙晶体,进 行了晶型和形貌分析。结果表明在两个不同体系中形成的碳酸钙属不同形貌同一晶型的晶体,CBP影响了 晶体的形貌但未改变其晶型,CBP不仅调控CaCCh生成还与晶体发生了键合或吸附作用。 主题词CBPCaCO±;形貌}晶型 中豳分类号:0642.5文献标识码:A 文章编号:1000—0593(2006)07—0247—02 钙结合蛋白(CBP)是一种非枯性蛋白。人们首先在胆固的环境中静置48 000 h.使沉淀充分生成。在4℃下用10 醇结石中发现CBP,随后Michael等人从胆色素型结石中也 m 发现之,并发现两类结石中的CBP具有一些共同的生物学 TA(pH8.2)溶液在搅拌状态下溶解该沉淀24h。所得的溶 特性和理化特性。Luk等人在ConAbindingprotein 解液经离心除去不溶物,将上清液充分透析,浓缩,冷冻干 (ConABP)与CBP的对比实验中发现,CBP对胆固醇的成核 燥,最后得到的物质即为CBP。(2)将0.8gNaHC03平铺于 并未产生明显的影响。由于结石中含有丰富的钙盐,为讨论 ~个250 mI.的大烧杯底部,同时将0,8gCaCl2平铺于一个 CBP在胆结石形成中的作用,本文采用体外模拟实验法,从 100mL的小烧杯底部,将100rnL的小烧杯置于250mL的 猪胆汁提取了CBP,研究了CBP对碳酸钙晶体生成的影响, 大烧杯中。然后沿着太烧杯和小烧杯的内壁缓慢加人不同浓 旨在探讨胆结石的形成机理及其影响因素,以期得到一些有 度的CBP溶液,直到内外两液面相接触,并高出内容器5 益的结果。 mm为止。在恒温(37℃)下放置7天,将所得沉淀分别用二 实验内容及方法:(1】CBP的提取:取新鲜胆汁,加入 次水、元水乙醇洗涤数次、真空抽滤、在40℃下恒温干燥, CaCl2,使其终浓度为0.5tool·L~。将此混合溶液在4℃后密封保存。 SEM ofthe formed Fig.1 mocphologieso_0嘎crystalsIn(a)distilledwater(b)5 CBP(c)10 CBP mg·mL一1 mg·alL一1 结果分析:将在不同条件下制得的CaC嘎晶体用扫描 mI,_1的CBP溶液中制得的,为分散性较好的球形,在每个 电镜进行形貌分析。图1(a)是在纯水中制备的CaCO;,从表 大的球体上还附着几个小球。图l(c)是在10mg·mE-1的 面上看是有一定规则性的菱形外貌,图1(b)是在5mg· CBP溶液中制得的形貌

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