黄精多糖抗新生大鼠大脑神经细胞缺氧性凋亡与坏死的研究.pdfVIP

主要与组织特异性或细胞株不同有关，因为不同的TLRs在不同的组织和细胞表达量有所不 细胞以及中性粒细胞和Dc细胞上。其次还与TLR4识别分支杆菌的壁成分有关。探讨猪苓多 糖协同BCG启动非特异性免疫反应机制和可能的激活途径，也为揭示BCG膀胱灌注防治肿瘤 机理探讨提供了新思路。 黄精多糖抗新生大鼠大脑神经细胞缺氧性凋亡和坏死的研究 胡国柱1张进2唐宁3文珠·聂荣庆2 深圳，518055；4江西省医学科学研究所，南昌，330006) 急性与慢性神经细胞缺血／缺氧导致的死亡除坏死外还有凋亡。祖国医学在治疗缺血性 脑卒中方面已经积累了丰富经验，其中以补气、益气药物人参、黄芪、黄精为主药的方剂在 治疗脑中风中取得了较好的疗效，尤其是在脑神经功能恢复方面作用明显。体外研究表明人 参皂甙Rgl减少缺氧培养诱导的胚鼠脑神经细胞凋亡嘲，人参皂甙Rbl和黄芪通过提高bcl-2， 亡。黄精属补脾气养阴药，老龄大鼠口服黄精多糖，可以显著地提高组织中的超氧化物歧化 酶(SoD)活性。本文对黄精多糖进行抗神经细胞缺氧性凋亡的作用机理研究，旨在探讨补 气药是否均有抗神经细胞缺氧性凋亡及坏死的作用，并为临床预防和治疗缺血性脑病及抗衰 老的合理用药提供理论依据和思路。 l材料与方法 Supplement 33342(Sigma， (Merck批号537059)；AnnexinV试剂盒(德国宝灵曼公司产品)；抗兔IgG二抗ABC试剂 Cruz 多克隆抗体(Santa (CJ．MIX-3型，长沙长锦应用技术研究所)；24孔培养板(Costar ‘ Dickinson公司)。 型，Becton 1．2新生大鼠大脑皮层神经细胞原代无血清培养按照文献的神经细胞培养方法进行。 ’ 1．3新生大鼠大脑皮层神经细胞缺氧复氧培养按照文献的神经细胞缺氧复氧培养方 219 法进行。 1．4 blue染色法按照文献的方法进行。 Trypan 1．5神经细胞Hoechst33342荧光染色按照文献的Hoechst33342荧光染色方法进行， 100％。 计数200个细胞，凋亡率(％)=凋亡细胞数／计数的细胞总数X 1．6Annexin V／PI双染流式细胞仪检测及DNA琼脂糖凝胶电泳按照文献[10]的方法进 行。检测软件为CEUQuest，数据使用MouFitLT软件分析及统计。 1．8实验分组①正常对照组：神经细胞在37。C，5％C0：，饱和湿度培养；②凋亡阳 性组：神经细胞培养4天后再缺氧复氧培养；③黄精多糖组1、组2、组3：在缺氧培养前 的黄精多糖，再进行复氧培养48h。 1．9统计学分析实验数据均以F±SD表示。采用单因素方差分析方法。 2结果 2．1新生大鼠大脑皮层神经细胞原代培养中的神经细胞含量：新生大鼠大脑皮层神经细 2．2黄精多糖对培养的新生大鼠大脑皮层神经细胞的毒性作用：神经细胞培养4d后加 入黄精多糖继续培养48h，Trypan 表I 黄精多糖对神经细胞的毒性作用。 组 别 神经死亡率％(i。±S) 正常对照组 7．96±1．25 黄精多糖lmg／ml组 7．96±0．82。 黄精多糖5mg／mi组 8．34+0．84- 黄精多糖6mg／ml组 8．42±O．42。 黄精多糖7mg／ml组