宁海土鸡禽流感抗体消长规律地研究.pdfVIP

研究报道 宁海土鸡禽流感抗体消长规律的研究 徐守荣林金杏李国强 (浙江宁波市振宁牧业有限公司315600) 摘要：通过红细胞凝集试验(HI试验)，对宁海土鸡母源抗体及使用禽流感病毒灭活苗(H5N1，Re一 1株)免疫效果进行检测，掌握禽流感HI抗体产生及消长变化规律，制定合适的预防高致病禽流感的免 疫程序及免疫规范。 关键词：宁海土鸡；禽流感；抗体消长；变化规律；免疫程序 禽流感(Avian 合症。世界动物卫生组织将其列为A类动物疾病，我国将其列为一类动物疾病。该病呈世界性存在和发 生，给养禽业造成巨大的经济损失，同时严重地危害人类的健康和生命安全。世界禽流感防控实践证明， 使用有效的禽流感疫苗进行预防免疫是防控禽流感最为有效的措施之一。目前我国已研制出重组禽流 感病毒灭活苗等一系列用于预防禽流感的疫苗¨。2o。 宁海土鸡是我公司经过多年选育而得的品种，并于2006年通过浙江省品种审定。本试验通过使用 重组禽流感病毒灭活苗(H5N1，Re一1株)对宁海土鸡进行免疫，并对免疫效果进行连续检测，研究其禽 流感HI抗体消长规律，并据此对本公司现行的种鸡和商品代鸡的高致病禽流感免疫程序和免疫规范进 行检测。 1材料与方法 1．1 材料 1．1．1试验动物 取900只1日龄宁海土鸡(本公司提供)，按常规方法进行饲养管理。 1．I．2禽流感疫苗 禽流感灭活油乳疫苗(鸡用)采购自梅里亚动物保健有限公司。 1．1．3抗原和血清 禽流感H5N1抗原和禽流感H5N1阳性血清均由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所提供。 1．1．41％鸡红细胞悬浮液 采取SPF公鸡抗凝血，用生理盐水反复洗涤5次，配制成1％红细胞悬浮液。 1．2 方法 1．2．1 免疫程序 商品代：20日龄首免禽流感病毒灭活苗0．3ml，皮下注射；50日龄二免禽流感病毒灭活苗0．5ml，皮 下注射。 下注射；130日龄三免禽流感病毒灭活苗0．5ml，皮下注射。 1．2．2试验设计 181 首届中国黄羽肉鸡行业发展大会 每组一出雏就进行禽流感抗体检测，每七天检测一次，每次从各组随机抽取30jl检测第1组榆测 至28H龄，第2组检测至63}t龄，第3组榆洲伞133|{龄 1．2．3血细胞凝集(H．～)试验 JJII n：96彳L、f巧4微fli反J．：i板进ij，J{j，l二j单盐水将打℃嵋ifl《寸f-匕怖f#，t：HL1％妈多I：纠{¨j包，g：jf；传25·“ 1．2．4 宝I：细胞凝集抑制(ttl)试验 1．2．4．1被检血清制备 从宁海上鸡翅静脉采血，并分离血清，其【fl·、#用j：检测；乃·、t-f氐温(47c)保仔，以备核检 1．2．4．24￡0-位病毒抗原液的制备 根据禽流感H5N1抗原的血凝价，用生理盐水稀释，配制成4单f扛病毒抗原液 1．2．4．3检测步骤 在96孔V型微蹬反应板I：进行，用生理盐水将被检血清作对比稀释，每孔家4单佗病毒抗原液 25ul，加1％鸡红细胞悬浮液25ul，同时做阳性血清和红细胞对照孔，微量振荡器振荡Irain，窀温感作适 当时间，以出现完全不凝集的血清最高稀释度为该被枪m清III效价一 1．2．4．4枪测结果评定标准 31 092为f叮疑，HI价大j：或等于41c)92为阳性 小f或等于21092判定HI试验阴性；HI价等r 2 试验结果 2．1 母源抗体检测结果 试验1组的宁海土鸡由于不注射疫苗，所以其检测结果即为f：j=源抗体的检测结果，}苷见农1 表1 试验l组免疫抗体HI效价(平均值，以l092表示) 2．2 首免效果检测 试验2组在20日龄进行首免后，其抗体效价逐渐1-Yt·，至35f