OsDCL3b基因沉默对穗生长发育影响.pdf

摘要 摘要 Dicer／DCL的直接生物学功能主要是加工生成各种具有调控功能的小分子RNA， 这些调控小RNA进一步影响其他相关蛋白基因的时空表达，进而影响生物个体 的生长发育、抗病虫害能力和逆境适应能力等。因而，研究Dicer／DCL蛋白基 因的功能对揭示真核生物的基因表达调控机理具有十分重要的意义。 本研究基于RNA干扰技术，对水稻OsDCL3b进行了转基因沉默分析，获 得了影响稻穗生长发育的T2代转基因阳性纯合植株，发现OsDCL3b基因主要影 响21m和24m大小的小RNA的生物合成，为深入研究D．国C船6基因调控稻 穗生长发育的遗传途径奠定了基础。 主要结果如下： 利用农杆菌介导转化水稻中花11，获得了转基因T2代阳性纯合株系。 系DCL4．6和DCL6．1幼穗中的表达量分别比其在野生型中花11幼穗中的表 达量减少了约30％和70％；大田种植成熟期表型分析结果表明，这2个T2 代转基因纯合株系植株的结实率分别只有40．O％和37．7％，而野生型中花11 的结实率高达91．7％，同时这2个T2代转基因纯合株系植株的每穗枝梗数和 总粒数变少，穗长变短；表明OsDCL3b基因与稻穗的生长发育密切相关。 3、对DCL6．1和对照中花11幼穗中大小为21～36nt的小RNA进行测序比较分 析发现，仇DCE铀基因主要影响2lnt和24nt大小的小RNA的生物合成； 这些小RNA在水稻第2号染色体上分布最多，分别占总数的32．9％(DCL6．1) 和24．3％(对照中花11)，在水稻其他染色体上的分布量均未到总数的10．0％。 关键词：OsDCL3b基因；基因沉默；生长发育；稻穗 ABSlRACT ABSTRACT Dicerisa conserved ribonuclease，namedDicer-like(DCL)in highly plants．The direct ofDicer／DCLis varioussmallRNAwith role principalbiological processing smallRNAf-Rrtheraffectsthe regulatedfunction，theseregulated space—timing ofother influencethethe related on expression protein-codinggene，then fordefensevirusinfectionand under of development，capability adaptabilityhardship onthefunctionofDicer／DCLwouldhavea eukaryotes．Thus，research significant forrevealthe regulated ineukaryotes． meaning geneexpressionpathways Inthis basedonRNA the study，we interferingtechnology，analysis