粉尘螨疫苗对粉尘螨变应原诱导小鼠气道变态反应炎症影响及其机制与研究.pdfVIP

摘要 摘 要 目的：通过对哮喘模型小鼠鼻腔免疫标准化粉尘螨疫苗进行治疗，探讨标准化粉 尘螨疫苗对粉尘螨变应原诱导的变态反应性气道炎症的免疫保护作用，探 讨标准化粉尘螨疫苗在支气管哮喘抗原特异性免疫治疗中的机制。 方法： l、 粉尘螨疫苗治疗组。正常对照组不做处理。用粉尘螨变应原提取液诱发哮 喘制作哮喘小鼠模型，哮喘小鼠模型制作成功后用标准化粉尘螨疫苗(400 Ilg)在小鼠麻醉状态下行鼻腔免疫，连续免疫8次，每次间隔1天，免疫 Der p 结束1周以后，用50g／50“l f变应原滴鼻激发，每天1次，连续 7次。 2、 各组小鼠气管插管进行支气管肺泡灌洗，观察支气管肺泡灌沈液(BALF) in 中细胞总数和细胞分类；各组小鼠取肺组织，通过HE染色(haematoxyl andeosin)观察小鼠肺部炎症变化。 3、 检测肺泡灌洗液中IL一10、IL-4和IFN-Y水平；同时检测脾细胞在变应原 特异刺激下分泌的IL一10、IL-4和IFN—Y水平。 4、 各组小鼠用MTT法检测脾淋巴细胞增殖反应。 5、 各组小鼠用流式细胞仪检测脾淋巴细胞中的调节性T细胞数量。 6、 lOOmg／ml浓度的乙酰甲胆碱激发，观察气道高反应性Penh值的变化。 结果： 1、 哮喘模型组小鼠激发后可见咳嗽、喘息、呼吸加深加快，烦躁不安等症状； 标准化粉尘螨疫苗治疗组激发后也可见类似症状和体征，但明显减轻。 2、 正常对照组小鼠肺部无病理改变；哮喘模型组肺部出现明显的变态反应性 炎症；标准化粉尘螨疫苗治疗组肺部变态反应性炎症较哮喘模型组明显减 轻。哮喘模型组小鼠肺泡灌洗液细胞总数为(159．604-15．08)、嗜酸性粒 细胞数为(33．20±3．76)I标准化粉尘螨疫苗治疗组肺泡灌洗液细胞总数 摘要 准化粉尘螨疫苗治疗后肺泡灌洗液细胞总数和嗜酸性粒细胞数都有所下 降，标准化粉尘螨疫苗治疗组与模型组比较有统计学意义(PO．01)。 3、 pg／m1)，与之相比，标准 pg／m1)、(52．5±2．66pg／m1)和(53．80±1．00 4、 ±3．71)、(76．oo±7．12)；标准化粉尘螨疫苗治疗组各参数与模型组比较 有显著差异(PO．01)。 5、 与模型组相比，标准化粉尘螨疫苗治疗组脾淋巴细胞增殖受到抑制 (PO．01)。 6、 与模型组相比，标准化粉尘螨疫苗治疗组小鼠能明显诱导调节性T细胞数 量增加(PO．01)。 7、 与模型组相比，标准化粉尘螨疫苗治疗组小鼠治疗后，气道高反应性明显 降低，有显著差异(P0．01)。 结论： 标准化粉尘螨疫苗鼻腔免疫治疗能够诱导调节性T细胞，诱导Thl为主的免 疫应答，有效抑制变应原诱导的气道高反应性、过敏性气道炎症和血清IgE 抗体的产生。 关键词： 粉尘螨；哮喘；标准化粉尘螨疫苗；鼻腔免疫； Il Abstract Abstract aimofthe isto the and OBJACTIVE：The presentstudy investigate efficacy ofstandard mechanism Dermatophagoidesfari