独活挥发油对N-脂肪酰基乙醇胺水解酶的抑制作用以及抗炎作用的研究.pdf

摘要 摘要 目的：研究独活(Radix Pubescentis，RAP)挥发油对内源性大麻 Angelicae Acid Amidase，NAAA)、脂肪酰胺水解酶(FattyAcidAmideHydrolase，FAAH)、单 酰基甘油酯酶(MonoacylglyceroI Lipase，MGL)水解活性的影响以及对脂多糖 (LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264．7炎症反应模型的抗炎作用以及可能机 制的探讨。 方法：采用水蒸气蒸馏法提取独活挥发油，GC／MS检测化学成分；采用 NAAA、FAAH、MGL过表达细胞蛋白和LC／MS检测内源性大麻素水解酶 立细胞炎症反应模型；采用LC／MS检测细胞内Ⅳ-棕榈酸乙醇胺 检测肿瘤坏子因子．0l(TNF-0‘)、诱导型一氧化氮合酶(酣OS)、白细胞介素．6 Griess法检测一氧化氮(No)含量。 结果：独活挥发油可有效抑制NAAA水解活性，对FAAH只有在高剂量下 有一定的抑制作用，对MGL没有抑制作用；GC／MS鉴定出独活挥发油的主要 应模型中，独活挥发油能够逆转炎症反应的发生，呈现出PEA升高和炎症因子 mRNA表 表达降低：细胞内PEA水平上升，炎症因子TNF-a、IL．6以及iNoS 达、TNF．旺和NO释放在炎症模型中被抑制。 结论：独活挥发油通过抑制NAAA水解活性，升高细胞内PEA水平，降 低炎症因子表达，从而发挥其抗炎作用。 关键词：独活挥发油；Ⅳ-脂肪酰基乙醇胺水解酶；Ⅳ-棕榈酸乙醇胺；脂多 糖诱导炎症 Abstract effect the ofRadix objecfive：Toinvestigate AngelicaePubescentis(RAm essentialoilonendoeannabinoid Acid AcidAmide Amidase(NAAA)，Fatty Lipase anddemonstratethatthemechanismofRAPessentialoilon OVIGL)activity effect vitro anti-·inflammatorybyusing／n inflammationmodel． Method：RAPessentialoilwas steam extracted the bY distillation，and chemical wereidentified was components byGC／MS．Enzymaticactivityperformed recombinant anddetected byusing NAAA，FAAH，MGL-overexpressingprotein by wereextracted methonal／chloroformmixand LC／MS．Lipids byusing analysisby LC／MS．mRNAand levelsof were