白三叶根的解剖结构观察.docVIP

研究生课程论文（作业）封面 （ 2009 至 2010 学年度 第 2 学期） 课 程 名 称：植物显微技术2.549 学 生 姓 名：李微 学 号：1004250 年 级： 2010级 提 交 日 期： 年 月 日 成 绩：__________________ 教 师 签 字：__________________ 开课---结课：第 周---第 周 评 阅 日 期： 年 月 日 东北农业大学研究生部制 白三叶根的解剖结构观察 白三叶，学名：Trifolium repens，茎匍匐，无毛，茎长30-60厘米。掌状复叶有3小叶，小叶倒卵形或倒心形，长1．2—2．5厘米，宽1—2厘米，栽培的叶长可达5厘米，宽达3．8厘米，顶端圆或微凹，基部宽楔形，边缘有细齿，表面无毛，背面微有毛；托叶椭圆形，顶端尖，抱茎。花序头状，有长总花梗，高出于叶；萼筒状，萼齿三角形，较萼筒短；花冠白色或淡红色，旗瓣椭圆形。荚果倒卵状椭圆形，有3—4种子；种子细小，近圆形，黄褐色。花期5月，果期8-9月。Nicotiana tabacum）的根 1.2　仪器与试剂：旋转切片机；展片台；温箱；乙醇：分析纯；二甲苯：分析纯；甲醛：分析纯；冰醋酸：分析纯；石蜡。 2.方法 2.1 固定：将根和根尖切成0.5cm左右小段，转入70%的FAA溶液(70%乙醇：甲醛：冰醋酸=90：5：5)中固定24小时以上待用。 2.2 脱水及透明：70%酒精→85%酒精→95%酒精→纯酒精→纯酒精→2/3纯酒精+l/3二甲苯→1/2纯酒精+l/2二甲苯→1/3纯酒精+2/3二甲苯→纯二甲苯→纯二甲苯(每个梯度透明2h，其中95%酒精时加适量番红过夜，纯酒精及纯二甲苯为1h)。 2.3 渗蜡：第二步纯二甲苯后加入适量蜡削至饱和，并置于37℃烘箱中过夜。第二天早上把烘箱调至65℃后，倒出1/2的体积，再加入1/2体积的纯蜡→倒出1/2体积，再加入1/2体积的纯蜡→倒出1/2的体积，再加入1/2体积的纯蜡→全部倒出，加入纯蜡→全部倒出，加入100%纯蜡(每个梯度2h，全部倒出为1h)。 2.4 包埋用预先用硬纸折成的纸船，编号后，把从65℃烘箱中取出的纯蜡倒入纸船中，用预热的镊子把材料迅速置入纸船中，摆好位置，自然冷却。 2.5 修块及切片：待纸船中的蜡完全凝固后，将蜡块取出，用单面刀片修刻成梯形，粘附于小木块上。旋转切片机切片，厚度为8μm。 2.6 粘片及展片：在干净的载玻片上涂微量粘片剂(1：1的蛋白质与甘油)，把蜡带按顺序置于载玻片上，滴适量蒸馏水，置于45℃的展片台上，使蜡带完全舒展。 2.7 烘片：将载玻片置于38℃的烘箱中4～2.8 染色：把烘干的载玻片放在染色架上，按下列步骤进行染色：纯二甲苯(1h) →纯二甲苯(1min) →2/3纯酒精+l/3二甲苯(2min)→1/2纯酒精+l/2二甲苯(2min)→1/3纯酒精+2/3二甲苯(2min)→100%酒精(1min) →90%酒精(2min) →85%酒精(2min) →70%酒精(2min) →50%酒精(2min) →30%酒精(2min) →蒸馏水(2min) →1%番红(5min) →蒸馏水(2min) →30%酒精(2min)→50%酒精(2min) →75%酒精(2min) →85%酒精(2min) →95%酒精(2min) →0.5%固绿(15～能清楚地看到根的初生结构由外至内分别为皮层维管柱 A 10×10 B 10×20 图1.白三叶根部的横切面 根尖纵切面： 根尖各个结构分区明显，有分生区、伸长区、成熟区；表皮细胞排列紧密，细胞呈方形；伸长区内有明显的液泡，表皮好像有突起。 图2.白三叶根尖横切面 10×20 4.讨论 白三叶于16世纪后期在荷兰首先栽培，现在温带地区广泛分布。喜温暖湿润气候，适应性广，耐酸性强， pH4.5的土壤仍能生长，除盐碱土外排水良好的各种土壤均可生长。再生性好,耐践踏,属放牧型牧草。