cDNA芯片在急性白血病中研究基因表达谱与拷贝数变化的应用.pdfVIP

专题报告 融产物冲击DC再诱导产生肿瘤特异性CTL，在体外大量扩增后输入经亚致死剂量照射诱导的淋巴细胞 缺陷受体，可望使其在受体体内进一步大量增殖，并增强其抗肿瘤效应。最近我们应用小鼠自血病模型 研究表明，在诱导小鼠淋巴细胞缺陷状态后，输入的异基因脾淋巴细胞可以得到有效扩增，但接种抗原 特异性脾细胞的扩增对随后接种的自血病细胞生长并无抑制作用，与之相反，致敏的抗原特异性脾细胞 在淋巴细胞缺陷受体小鼠体内扩增速度更快，扩增的倍数更高，并具有显著增强的抗白血病作用。 此外，为了深入了解抗原特异性T细胞治疗自血病的疗效和毒酎作用，有必要对输入体内的T细胞的 存活情况、迁移和功能进行监测。并且对治疗后复发的肿瘤细胞的生物学变化进行研究，为将特异性T 细胞治疗列入异基因移植方案打下实验基础。 20． cDNA芯片在急性白血病中研究基因 表达谱和拷贝数变化的应用 应 康 上海联合基因公司 (上海200433) DNA芯片技术是继DNA重组技术，PCR扩增技术之后的又一重大生物技术。基于微阵列实验， 可以同时观察在某一生命现象中成千上万个基因的动态表达水平，与过去的研究模式即单个基因的表达 研究相比，分子生物学工作者的观念将由此发生巨大改变，使得人们能够在基因组水平上以系统的，全 局的观念去研究生命现象及其本质。目前，基因芯片技术已应用到肿瘤分类，肿瘤分型，基因功能研究， 基因调控网络构建，药物靶位识别等许多方面。 急性白血病是一种世界范围内的高发的癌症。在临床治疗上应根据病^不同的临床表现，分别采取 强化治疗或普通治疗，以提高治愈率而减少死亡率。随着eDNA芯片技术的发展。有望从分子水平彻 底了解该疾病的发生发展机制，为临床预防、治疗、预后提供可靠的理论依据。通过利用cDNA芯片 技术进行相关研究，得到大量的白血病相关基因信息，利用生物信息技术，分析数据，找到一些候选基 因作为基因治疗的靶位点，达到分子诊断和分型的目的并为早期诊断提供依据。自1994年基因芯片问 世以来，至今已有多篇文章报道基因芯片能用于肿瘤组织类型的诊断。Golub在1999年首先应用基因 分类租关，进一步分析其中50条基因，发现它们与AML、AI工的分类密切相关。使用cDNA芯片， 我们比较了22例急性白血病病人与正常人骨髓细胞的表达谱差异。在10例病人中都表现有差异的基因 因一致上调，708个基因一致下调。这些基因在不同的亚型白血病中表达改变不同，在层级聚类中发现， 两簇基因(细胞周期和细胞凋亡相关)和急性白血病的亚型分型密切相关。这些基因涉及转录因子、细 测基因，所检测的其中45条基因均异常表达，并符合舭、AML的分型标准。我们用这45条基因鉴 专题报告 ——————-————————————————_——————————————————————————————————————————————————一 出的AML、ALL分型标准，表明基园芯片诊断运用于急性白血病亚型临床诊断是可行的。我们研究还 胞株中都发现上调表达，高度提示这7条基因与原发性耐药相关，有继续深入研究的价值。比较基因组 ．—一 Genomic 杂交(CGH，Comparative 上的变化情况。我们在研究中采用一种基于cDNA芯片的CGH技术，研究白血病细胞系的DNA拷贝 数变化。通过这种方式，我们可以高通量的从基因组水平检测基因的扩增缺失情况，并结合表达谱差异 贝数和表达水平同时上调和下调的基因。结合染色体定位信息，我们验证了以往所报道染色体缺失和重 血病的发病机理提供了一些有意义的参考。 以前的白血病分类技术高度依赖于病理学工作者对肿瘤组织的临床诊断，而基于微阵列技术，即使 一些组织没有显著变化，利用基因表达谱也可以对之做出早期诊断；另外．特别重要的一点足可以根据 基因表达谱的变化来区分形态学上相似的肿瘤，这样对肿瘤类型(tumortype)的精确识别有助于制定配套 的最佳方案，从而达到增加疗效，降低毒性的目的。基于基因表达谱靛．≥性白血病分类和(microarray --CGH)研究对急性自血病发生机制的理解以及征服这种癌症提供了重要思路。 21． 骨髓间充质干细胞诱导免疫耐受的研究 陈虎 解放军3