基于二硫键修饰的Pluronic与PEI共聚物基因载体的制备与转染研究.pdfVIP

基于二硫键修饰的Pluronic与PEI共聚物 基因载体的制备与转染研究 张立芬* 陈真真 李彦锋 兰州大学化学化工学院，生物化工及环境技术研究所，兰州730000 在许多先天性及后天获得性的疾病的治疗中，基因治疗展现出诱人的前景，成为疾病治 疗研究的热点[1]。在非病毒基因载体中，聚乙烯亚胺(PEI)被广泛认为是较好的阳离子聚 合物之一，它可以有效的将DNA进行压缩，然后通过自身的“质子海绵效应”使基因有效地 传递到细胞核中，从而实现较高的转染效率[2]。但由于其具有与电荷量相关的细胞毒性，限 制了其临床使用。 第16届反应性高分子学术讨论会 间较大位阻的屏蔽作用继而减少了细胞表面上正电荷的聚集。 通过琼脂糖凝胶电泳的迁移来检测P123jg．PEI-SS与质粒D1嗵A的复合能力。图3电泳 P123．g．PEI-SS与DNA的复合物在水溶液中发生自组装，形成的球形纳米粒子粒径尺寸约 为150衄，且具有较均匀的分散性，表明该聚合物可以较好与DNA进行较好压缩。 N伊：O 1 2 3 4 5 l=!!：二 图4N，P=20时Pl 图3 不同N／P的P123·g．PEl-ss，DNA 23一g-PEI．SS，DNA 琼脂糖凝胶电泳图 复合物TEM图 本文初步用Hela细胞来考察了聚合物介导质粒pEGFP．NI转染细胞的能力，PEI—SS与 PEI．25loa作为参照，直接使用倒置荧光显微镜来观察GFP在细胞内的表达情况。如图5 达大大提高，具有很高的GFP表达，即具有较高的转染效率。 一 一 一● ： ● ，．．{，^，■ {*^● B ～， 、 一 h一 ■ 一 ( 、 、 = 一 一 (N，P=20)在Hela细胞中转染的倒置荧光显微镜图 参考文献 Z，SallayG，KabanoVA．v．，BfDcD形Mg口纪西研1．【J]，2008，19：1987-1994 【1】Yang R．，KimT．H．，KimYK，eta1．，曰fD研口胞胁b【J】，