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中国食品科学技术学会营养支持专业委员会
13一胡萝卜素的抗氧化生物活性研究
韩磊 马爱国 梁惠
生物体内一定的自由基水平是维持正常生命 1.1.2动物饲养饲料配方采用美国农业部、人类营
活动所必须的,自由基与细胞的增殖、分化、凋亡、 养研究中心的啮齿实验动物的AIN.93M的饲料配
坏死等多种病理、生理现象密切相关。机体正常情 方【4】。缺乏组大鼠用市售大豆色拉油按lml/kg灌胃,
况下的氧化和抗氧化处于一种动态的平衡之中,过 其余四组大鼠用市售的大豆色拉油稀释成不同浓
量的自由基特别是活性氧自由基(ROS),可以攻击度的B.C油剂灌胃。除B.胡萝卜素由灌胃方式提
包括DNA、脂质、糖在内的几乎所有的生物大分子, 供外,其他营养素均配成混合饲料(五个剂量组饲
产生多种不同的后果如肿瘤、畸形和衰老掣11。 料中均不含VA)在600C以下烘干成饼。自由进食,
13一胡萝卜素(13一C)作为维生素A的前体发挥实验期为8周,隔周收集尿液。
着重要的生理功能。随着对13-C研究的不断深入, 1.2试剂与方法
其抗氧化作用的研究越来越引起关注,被认为是机 1.2.1试剂20%天然B.胡萝卜素油剂由武汉星辰现
体单线态氧的淬灭剂,有效的抗氧化剂,能有效地 代生物工程有限公司提供。B.胡萝卜素、06-MeG
清除氧自由基,降低脂质过氧化物损伤,在维持细
胞膜的结构和膜质流动性功能方面可能起到一定
的作用[2】。近年来,尽管国内外研究普遍认为13-C成生物工程研究所提供。正常熔点琼脂糖、低熔点
是一种重要的营养性抗氧化剂,在机体内抗氧化防
御系统的非酶系统中作为重要的组成部分【3】;但对 Mannheim公司提供,淋巴细胞
DAPI由Boehringer
不同剂量尤其是高剂量B.C补充的抗氧化活性的 分离液(上海恒信化学试剂有限公司产品)。
研究尚存在不同的争论,因此,本研究旨在通过动 1.2.2仪器荧光分光光度计(日本岛津RF.540);
物实验探讨不同剂量13--C的抗氧化活性及其对细LS一50型荧光分光光度计;低温离心机(德国Sigma
胞功能活性的影响,为指导人群安全适量的摄入提 3K30型),制冰机(英国IM20K型),荧光显微镜
供参考。 (日本OLYMPASBH.2型),配有紫外检测器的
1材料和方法 P/ACE5000型全自动毛细管电泳仪,用Gold软件
1.1实验动物分组及饲养 控制仪器操作数据采集(美国Beckman仪器公司提
1.1。l动物分组选择成年Wistar大鼠,体重为 x
供),毛细管柱(75umid57cm)。
1.2.3血样采集大鼠乌拉坦麻醉,腹主动脉取血,
200.2209,由青岛市实验动物和动物实验中心提供
u
(合格证号:200002003),随机分为5组,每组14抗凝。取800l红细胞,制成红细胞膜备测;120
只,雌雄各半,分笼喂养。B.C干预剂量分别为: 微升全血用于DNA损伤分析,其余全血离心后取
血浆测定相关指标。
13.C1组为缺乏组(饲料配方中不含B.C),补充剂
量0.071(B-C2组)、0.355(B.C3组)、、4.28(B1.2.4血浆及肝脏中维生素A测定采用微量荧光
法,方法参见文献【51。
-C4组)和15.00me,/(kg·d)(13.C5组)。
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