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电解质及药物对离体蛙心活动的影响 【教学对象与学时】 一、教学对象：五年制本科 二、学时：4学时 【目的要求】 1、掌握Straud离体蛙心的灌流方法 2、观察钠、钾、钙三种离子与肾上腺素、异丙肾上腺素、去甲肾上腺素、 乙酰胆碱、 强心甙、氨茶碱等对离体心脏的作用 【课堂提问及解答】 离体蛙心如何制备？ 蟾蜍双毁髓，将双毁髓的蟾蜍仰卧固定在蛙板上，夹起胸骨后端的腹部皮肤剪一小口，再将手术剪由切口处伸人皮下向左右两恻锁骨外恻方向剪开皮肤，并向头端掀开。用镊子提起胸骨后端的腹肌并剪一小口，将手术剪由切口处伸人腹腔内，紧贴胸壁（以免损坏心脏和血管）沿皮肤切口剪开肌肉，剪断左右鸟骨和锁骨，使创口呈倒三角形。用眼科镊提起心包膜并用眼科剪剪开即可暴露心脏。 肾上腺素、 乙酰胆碱、 强心甙、氨茶碱这几种药物中能增强心脏收缩张力的是哪几个？ 肾上腺素、强心甙、氨茶碱 【实验原理介绍】 蟾蜍心脏离体后，用理化特性近似其血浆的任氏液，在一定时间内可以保持心脏节律性收缩舒张，改变灌流液成分，心脏收缩舒张幅度与频率会随之变化。 【重点和难点】 一、重点 1、Straud离体蛙心的制备与灌流方法； 2、BL-420生物信息记录系统检测记录心肌收缩张力曲线。 二、难点 1、0.65%NaCl对心肌收缩张力曲线影响的机制 2、乙酰胆碱对心肌收缩张力曲线影响的机制 【观察指标】 心功能：心跳频率、幅度，曲线和舒缩程度药品、器材生物信息记录仪、张力传感器、蛙类手术器械一套、玻璃分针、滤纸、棉球、浇杯2个、缝线、滴管2支、蛙心夹 、铁支架、双凹夹2个、试管夹、蛙心插管、任氏液、0.65%NaCl、3%ＣaCl2、1%KC1:10 000肾上腺素、1:100 000、1:100 00异丙肾上腺素、25:1000氨茶碱(2.5%)、25:100 000毒K(0.025%)心功能：心跳频率、幅度，曲线和舒缩程度1、traud离体蛙心制备 （一）蟾蜍双毁髓术 （1）枕骨大孔的定位： 左手握住躯干及肢体，右手母指与食指握住蟾蜍的唇尖部前后摇动，在其头部背面可见一明显的凹陷点即为枕骨大孔处或左手握住蟾蜍躯干及肢体，食指向下压蟾蜍的头部，用金属探针（蛙钻）由枕骨沿正中线向脊柱端触划，当触到凹陷处即枕骨大孔处。 （2）蟾蜍双毁髓 金属探针从枕骨大孔垂直进针后与躯干平行向前折插入颅腔左右搅动捣毁脑组织，再将针尖后退至枕骨大孔与躯干平行向后折刺入脊椎管捣毁脊髓至蟾蜍四肢松软、呼吸消失既可备用。 （三）蛙心标本制备 蟾蜍双毁髓，将双毁髓的蟾蜍仰卧固定在蛙板上，夹起胸骨后端的腹部皮肤剪一小口，再将手术剪由切口处伸人皮下向左右两恻锁骨外恻方向剪开皮肤，并向头端掀开。用镊子提起胸骨后端的腹肌并剪一小口，将手术剪由切口处伸人腹腔内，紧贴胸壁（以免损坏心脏和血管）沿皮肤切口剪开肌肉，剪断左右鸟骨和锁骨，使创口呈倒三角形。用眼科镊提起心包膜并用眼科剪剪开即可暴露心脏。 （10）当心力出现衰竭时，加入25:10000氨茶碱0.3ml，观察心功能变化。药物作用不明显时，可适量增加，密切观察药物剂量添加后的实验结果。0.65%NaCl 减慢 减小 3%CaCl2 增快 增大 1%KCI 增快 减小 1：10000肾上腺素1：1000001：10000异丙肾上腺素低钙任氏液25：100000毒K25:10000氨茶碱0.65%NaCl： 2、3%CaCl2 3、1%KCI 4. 肾上腺 5. 乙酰胆碱 6、1：10 000异丙肾上腺素低钙任氏液25：100 000毒K25:10 000氨茶碱0.65%NaCl，1：100 000Ach低钙任氏液3%CaCl2，1：10 000肾上腺素1：10 000异丙肾上腺素25:10 000氨茶碱25：100 000毒K1%KCI可使蛙心频率增快，心跳幅度减小 【思考题】 如任氏液中钾离子浓度明显增高，蛙心会处于什么状态？ 当显著高钾时，细胞膜内外钾浓度梯度减小，使得静息电位绝对值减小至－55mv，使得钠通道失活，从而使心肌细胞兴奋性丧失，心脏可停搏在舒张状态。 心率增快 心肌收缩力收缩 ↓↓ 心肌细胞胞浆Ca2+ ↓↓ 心肌细胞动作电位期间 Ca2+ 内流↓↓ 细胞外液Ca2+ ↓↓ 0.65%NaCl灌流 心肌收缩力增强 兴奋收缩耦联增强 肌浆Ca2＋浓度增加 工作细胞动作电位期间Ca2＋内流增加 自律性增加 慢反应细胞4期自动除极化速度增加 细胞外液Ca2＋浓度升高 动作电位期间Ca2＋内流性增加 兴奋收缩耦联被抑制 Ca2＋内流减少 心肌细胞兴奋性增高 静息电位与阈电位水平的电位差减小 静息电位绝对值减小 膜内外K＋浓度梯度下降 心肌收缩力下降 K＋抑制Ca2＋内流 细胞外液K＋浓度升高 复极期肌浆Ca2＋浓度降低速度增加 肌浆网对C