上海海域海洋细菌的分离及代谢活性产物地研究.pdfVIP

4宁·土t 奎毒辱洱t●杖术与辱洱南■学术套诅论文亲2咖．s．2_6 上海海域海洋细菌的分离及代谢活性产物的研究 宁喜斌，陶融，林敏 (上海水产大学，上海，200090) 摘要：本文对上海奉贤区海湾的海洋细茵进行了分离，鉴定，并对海洋细茵的区系进行了研究．利用 琼脂块法和管碟法进行抑菌活性初筛和复筛，得到抑茵能力较强的菌株．ⅡI抗茵谱也较广，几乎能抑 制测试革兰氏阳性和阴性茵． 关键词：上海海湾；海洋细菌；分离；鉴定；抑茵活·j生 陆生微生物发酵产物一直是制药工业重要资源之一，然而近年来由于在该领域研究方法的落后和 筛选模型的陈旧，寻找新的种属舶微生物或筛选出新的活性代谢产物的难度越来越大，因而造成新药 的开发面』瞄眺战Il J。海洋微生物资源广阔．据估计，所研究和鉴别过的海洋微生物不到整个海洋微生 物的5％。因此从海洋微生物的次级代谢产物中寻找开发有别于陆栖微生物产生的生理活性物质，成 为当前微生物应用研究的一个重要方向。对新药的开发而言，从海洋微生物中筛选抑菌活性菌株是一 项重要的前期工作。我国位于太平洋西岸是海洋大国，有渤海、黄海、东海、南海四大海域，地理条 件差异大，温度相差悬殊，海洋微生物资源极其丰富。对于黄、渤、．南海域的微生物资源利用已进行 相关的研究“J，但关于东海海域微生物资源的情况报道较少，本文就上海临近东海海域分离出的海洋 微生物进行抑菌筛选，为寻找新的抗菌活性物质提供参考。 l材料和方法 1．1样品采集 从上海奉贤海域浅滩采集海泥和海水样。 1．2菌株分离 平板涂布法。 1．3分离培养基 营养琼脂培养基、2216E培养基【6】、通用培养基、葡萄糖琼脂培养基、高氏一号培养基、#l、#2、 #3、#4、#5、#6t”。 1．4菌种鉴定 1．4．t形态特征观察：参考文献M。 1．4，2生理生化试验：参考文献槲。 1．5抑菌实验 1．5．1指示菌大肠杆菌(Escherichiacoli 1．72)，志 1．543)，金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus 51387)，沙门氏菌(Salmonella50041)等购于上海中科院微生物研究所。 贺氏菌(Shigella 1．5．2试验方法 初筛采用琼脂块法{”。 复筛采用管碟法门。 2结果与分析 2．1人工海水对分离效果的影响 分别用人工海水与自来水配置不同的培养基。仅以海泥作为分离对象。试验结果可以从表l看出 用自来水配置的培养基分离出的细菌种数较少．且有些菌落连成片状，苗落的个体形态难于分辨，不 能统计细菌总数。 510 t宁·王畦 套国露洱生曲技术乌喀淬番曲学术垂-议论文毒 2006．g．2．-6 用人工海水配置出的培养基分离效果明显优于自来水配置的培养基。每个菌落的形态易于观察， 有利于后面的实验进行。海洋细菌的生长需要一定的盐度与营养物质，用自来水配制出的培养基不适 于分离海洋细菌。 表1人工海水与自来水配制培养基的比较 培养基 营养琼脂培养基种 2216E #2 葡萄耱琼脂培养基种 种类 群数 细菌数 种群数 细菌数 种群数细菌数 群数 细菌数 (x103) (x103) (×103) (x103) 人工海水 5 49 5 92 3 Il 8 53 自来水 4 未计数4 53 l 束计数 6 192 2．3不同培养基对分离效果的影响 表2显示了海洋细菌在各培养基上培养2d和5d时的生长情况，从中我们可以看到n7、Y、PT、 3ZPA#5培养基的分离效果较好。