三焦针法-针刺干预对SAMP8老化度评分探析.pdfVIP

PCR和Western 以脂质体法转染HEP2细胞。ReM-time mRNA表达量较对照组下降了83．2％，同 GFP-Neo-SIOOA4载体并转染HEP2细胞。转染质粒组HEP2细胞中S100A4 时也显著抑制了蛋白的表达。转染质粒组HEP2细胞增殖速率明显下降(P0．叭)，细胞出现G1期阻滞。流式细胞术 HEP2的增殖、影响细胞周期和通过激活caspase3，8，9进而增强细胞凋亡。 【关键词】：RNA干扰；S100A4基因；喉癌； “三焦针法针刺干预对SAMP8老化度评分研究 王煜1温明菲2成海燕1于建春1韩景献1 (1天津中医药大学第一附属医院，天津300193；2天津中医药大学2010级硕士研究生，天津300193) 【摘要】目的：探讨“三焦针法”(原“益气调血、扶本培元”针法)对快速老化痴呆鼠SAMP8老化度的影响。方法： 以下简称非穴组)。采用13本京都大学制定的《老化度评分指南》对小鼠老化度进行客观评价。利用SPSSl6．0统计软件 包进行数据分析。结果：无论干预前、干预后，各SAMP8对照组老化度评分值均显著高于同月龄SAMRl组；同月龄各 SAMP8组问比较无显著性差异。干预前后自身对照结果表明，针刺能延缓Tl时点SAMP8小鼠快速老化进程；T2各组 干预前后老化度评分均无显著变化。结论：“三焦针法”在一定程度上减轻了Tl时间点的SAMP8的老化程度。 【关键词】：快速老化鼠；老化度评分；三焦针法 1材料与方法 1．1动物的选择与分组 对象，相同周龄的同源正常老化鼠SAMRl为正常对照。所有动物均来自国家二级动物房、天津中医药 大学第一附属医院实验动物中心SAM老化鼠繁育屏障系统。饲养条件为：室温24±2。C，湿度50～ 60％，自动控制光照循环12h光照／12h黑暗。每笼5只小鼠，自由进食、饮水，每周换笼一次。 组，Pc，n：20)；其余15只再随机按上述分组分为三组，每组5只，作为备选。另选取25只3月龄 后，进行干预实验。备选小鼠同样接受同组的干预实验。 基金项目：国家自然科学青年基金项目；天津市应用基础及前沿技术研究计划(09JCYBJCl2600) 作者简介：SE煜(1984一)，女，研究方向：老年期痴呆的基础研究。E-mailqq．con 通讯作者：韩景献(1946一)，男，研究方向：老年期痴呆的临床和基础研究。E-mail：hanjingxian6@hotmail．com ·88· SAMRl小鼠作为正常老化对照组，按照上述分组法分组和备选，进而接受干预实验。 1．2干预措施 所有针刺组均采用“三焦针法”，非穴组选取胁肋下非经非穴点针之，空白组及正常组行抓捉对照。 “三焦针法”取穴为膻中、中脘、气海、血海和足三里，非穴组取穴为双胁下两个固定非穴位点¨’2’31。每 日同一时间点干预一次，第7天全部动物休息一日，共干预疗程14天。所用针灸针规格为直径0． 秒。于第15天为每只动物一次性腹腔注射胸腺嘧啶核苷类似物，以后仍然按照每日干预一次，每固干 预六天，休息一天的频率继续针刺及对照干预。 选取末次标记后14天这个时间点的小鼠进行前后比较，此时末次标记后14天时，共干预4周小 鼠，此时3月龄的小鼠已达4月龄，这一干预时间点小鼠称为T1；5月龄的小鼠已达6月龄，这一干预时 间点小鼠称为r112。 1．2．1针刺取穴标准(见表1)。 表1针刺穴位 1．2．2针法操作要点(见表2)。 表2“三焦针法”操作要点 1．3老化度评分 每组小鼠均于疗程开始前一天及疗程最后一天干预措施结束后进行老化度评分。评分标准采用日 本京都大学竹田俊男和细川昌则教授制定的老化度评分标准M1，将外在形体及行为的老化改变从反应 性、被动性逃避反应、皮毛光泽、皮毛粗糙程度、脱毛程度、皮肤溃病、眼周损害、角膜混浊、角膜溃疡、白 内障、脊柱后凸等11项进行观察，再根据程度的不同将每项指标划分为3-5级不等，标定分值。根据这 个统一的评分标准，客观地给动物评分，积分越高则老化度越高∞。。 1．4统计学方法 所有实验数据皆以均数±标准差(x±S)的形式表示，并用SPSSl6．0统计软件包进行统计学分析。