珠海鱼类寄生单殖吸虫的形态分类及其寄生部位组织病理学观察.docVIP

珠海鱼类寄生单殖吸虫的形态分类及其寄生部位组织病理学观察 作者：郑艾丹、李雨桐、刘彦麟 学校：珠海市紫荆中学 指导老师： 邹小梅 刘咏华 摘 要：5种单殖吸虫：哈拉多唇虫Polylabris carnarvionensis、银鲈多唇虫Polylabris gerres、马氏多唇虫相似种Polylabris cf. mamaevi、鰕鯱鱼多唇虫Polylabris acanthogobii、广东似多唇虫Polylabroides guangdongensis。组织病理学显示：寄生过的鳃丝，轻度感染表现为鳃丝的不完整性，引起鳃丝局部机械性损伤；严重感染时可见寄生部位组织增生、肿大，细胞浸润，分布松散，细胞核处于细胞边缘，细胞间的联系不紧密。 关键词： 单殖吸虫 形态学 组织病理学 1、引言： 单殖吸虫（Monogenea）隶属于扁形动物门，在自然界分布广泛，有些种类以后吸器（后固着器）上的锚钩插入寄生部位，造成宿主寄生部位的病变，产生不良后果，感染严重时可导致宿主幼鱼或成鱼的死亡；或破坏器官的完整性，引起其他病原生物（如细菌、病毒等）的入侵，造成炎症，使机体产生病变；或者吸食鱼类血液、粘液等，刺激宿主产生的分泌物，使鳃呼吸受阻，影响正常的生理活动（张建英，1999）。 珠海地处珠江三角洲西南端、珠江出海口西岸,雨量充沛、土地肥沃；流经多条水系，形成得天独厚的咸淡水丰富自然资源，是珠三角重要的水产养殖基地。近年来，受到单殖吸虫的危害，珠海海水鱼类的网箱养殖、滩涂养殖遭受了不同程度的经济损失（张建英，2001）。 因此，本实验重在调查珠海主要经济鱼类寄生单殖吸虫情况，并对相关的单殖吸虫病原进行形态学上的鉴定。同时，为了探究单殖吸虫对寄主鳃丝的危害，了解其致病机理，本实验对寄主鳃丝做组织病理学上的研究。 2、材料与方法 2.1 标本采集 2.1.1 材料来源 本研究所用的标本源自2014年10月采集的珠海海水鱼类寄生单殖吸虫标本，宿主鱼为当地水产品市场或渔港码头购买的冰鲜鱼或活鱼。 2.1.2 宿主鱼的鉴定 宿主鱼的鉴定主要依据《中国鱼类系统检索》（成庆泰、郑葆珊，1987）和《南海鱼类志》（中国科学院动物研究所，1962）和台湾鱼类志网站。鱼类拉丁名的校对依据Fishbase (Pauly et al., 2011)。 2.1.3 寄生虫的检获 取出完整的鱼鳃，置于盛有海水的培养皿中，重复换水以洗去血渍和污物；用解剖剪分离各鳃片，检查是否有肉眼能见的大型单殖吸虫，借助解剖针或银针在解剖镜下拨弄鳃丝检查是否有单殖吸虫的寄生，再用弯头镊子或载玻片轻刮鳃片以使虫体脱落，在解剖镜下将虫体挑出并按照以下方法处理。 2.1.4 寄生虫标本的固定和保存 检获的单殖吸虫标本首先在解剖镜下进行活体观察，然后进行如下处理和保存：部分标本70%的酒精保存，用于染色观察。 2.1.5 单殖吸虫宿主与来源情况 表2-1 微杯科单殖吸虫宿主与来源情况 宿主 采集地点 采集时间 检获虫数（尾） 短棘鲾 珠海朝阳市场 2014-10-17 10 褐篮子鱼 珠海港 2014-10-24 6 小鳞尖尾鱼 珠海朝阳市场 2014-10-17 5 短棘银鲈 珠海朝阳市场 2014-10-24 5 黄鳍鲷 珠海港 2014-10-10 6 二长棘鲷 珠海朝阳市场 2014-10-24 0 静鲾 珠海朝阳市场 2014-10-17 0 细纹鲾 珠海朝阳市场 2014-10-24 0 宿主 采集地点 采集时间 检获虫数（尾） 方头鱼 珠海港 2014-10-10 0 中华单角鲀 珠海港 2014-10-10 0 鲻 珠海港 2014-10-10 0 斑鳍方头鱼 珠海朝阳市场 2014-10-17 0 叫姑鱼 珠海朝阳市场 2014-10-24 0 六指马鲅 珠海朝阳市场 2014-10-17 0 川纹笛鲷 珠海港 2014-10-24 0 黑鲷 珠海港 2014-10-24 0 大眼澳鲈 珠海港 2014-10-24 0 2.2 研究方法 2.2.1 永久标本的制作 （1）复水。将70%酒精保存的标本先后置于50%酒精、30%酒精、蒸馏水各10分钟。 （2）染色。将标本移入胭脂虫红中染色12小时以上。 （3）分色。染色后，用蒸馏水清洗2-3次，以洗去虫体表面残留的染液，然后滴加1%的盐酸酒精分色1-10分钟不等，依内部结构清晰的时间为止。 （4）脱水。依次用30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%（两次）各10分钟进行逐级脱水。 （5）将虫体转移至无水乙醇：松油醇（1:1）溶液和纯松油醇中各5分钟，洗脱酒精并将虫体透明。 （6）用中性树胶封片制成永久标本，标明宿主鱼的名称、