血清蛋白质指纹图谱用于胃癌早期诊断地研究.pdfVIP

融 论文汇编 恸 AC一6 血清蛋白质指纹图谱用于胃癌早期诊断的研究 薛文成①冯 凯。孟冬娅①郑燕华。张建中。康辉。辛彦④ ①中13t人民解放军沈阳军区总医院检验科②中国人民解放军306医院中心实验室③中国医科大学第一附属医院检验科 胃癌是对我国人民构成严重威胁的疾病之一．其发病率为 20／10万左右，死亡率在我国居癌症死亡率的第2位。胃癌患者不 良预后主要是由于不能早期诊断．中晚期胃癌治疗的局限性等因 素所致。目前依靠胃镜检查是发现早期胃癌的有效手段，但胃镜 5min，甩于；再用HPLC H20洗涤一次，立即甩干。拆开biopro． 检查存在诸多不便。寻找一种简单易行、灵敏度高、特异性强的早 cessor，取出芯片，晾干后，每点点加2次0．5斗lSPA。晾干后即可 期胃癌诊断方法是当务之急。血清学指标筛选是较为理想的手 上机测量。 段。遗憾的是。迄今为止仍未找到可靠有效的早期胃癌血清学标 1．5数据采集，处理 志分子。进来。表面增强激光解吸附离子化／时间一飞行质谱分析 的血清蛋白进行读取分析．设定最高检测分子量为50kD。优化范 (SELDI／rOF—MS)与蛋白质芯片技术结合使用的技术广泛用于肿 瘤标志物的筛选f1。2。31，本研究拟应用SELDDTOF—MS和蛋白质 芯片技术外加模式匹配运算法则探讨该技术用于早期胃癌诊断 滤去。采用Ciphergen 的可行性。 据，用质谱峰下面积表示蛋白质丰度。 1材料与方法： 以30例胃癌(10例早期、14例进展期、6例伴远隔脏器转 1．1临床病理资料 Pat． temsSoftware建立早期胃癌预警决策树分类器模型．用盲筛方法 研究对象：57例胃癌患者男：女41：16；年龄42～84岁，平均 检测其它未参加建模的患者及健康者。以验证上述早期胃癌分类 年龄60±15．3岁：临床病理分期：早期19例，其它38例；转移情况： 进展期胃癌患者仅3例未见淋巴结转移．其余均伴淋巴结转移； 模型的实用性。 伴脏器转移11例：肝转移9例，卵巢转移1例，肾转移1例。上述 1．6统计学分析 Wizard软件对数 胃癌患者病理资料均由术后系统病理诊断证实，由胃镜、病理诊断 采用CiphergenProteinchip3．1及Biomarker 据进行统计学处理。PO．05视为差异显著。 确诊的胃良性病患者7例。健康人26例，男：女18：8，年龄35。78 岁，平均年龄49±18．2岁，来源于肝功、肾功等检查均正常的体检人 结果 群。 1．早期胃癌决策树分类器模型构建 血清标本采集：所有患者于接收治疗前早晨空腹采集静脉 实验共获取早期胃癌与正常对照组之间的49个差异蛋白质。 血3Illl，静置凝结。待分出血清后。于2500rpm离心5min，分装血 清。冻存于一70℃冰箱中备用。 正常对照作为训练组．上述49个差异蛋白质峰为基础．建立决策 1．2主要试剂 树分类器模型．下面选择对早期胃癌分类效果较好的三个模型将 尿素、乙腈、三氟乙酸、’Ks—HCl pH9．0、CHAPS、DTY、NaAc、 HPLC H20、Hepes等均购自Sigma公司。 1．3仪器