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药物筛选模型和技术及其在中药活性成分研究中的应用 张志琪，田振军，张延妮(陕西师范大学化学与材料科学学院天然药物研究室．西安710062) 药物筛选是指从众多的化合物中，筛选出具有生物活性的化合物的过程。经典的中药活性成分研究方 法是通过提取中药中单一成分或抽提出某—馏分，再进行药理实验确定其活性成分，这种方法步骤烦琐。劳 动强度高，并且成功的概率低。近年来，人们广泛应用生物模型及药物作用靶标进行药物筛选的研究工作． 这些方法和技术在中药活性成分研究中也得到了一定程度的应用。本文就整体动物模型、受体模型和分子 生物色谱、细胞模型和细胞膜色谱、基因芯片技术4个方面及其在中药活性成分研究中的应用作一综述。 1整体动物模型 神农尝百草应该是最早的整体动物药物筛选。应用实验动物，则是现代医药学发现药物的主要途径，直 至今日，仍然具有十分重要的意义，尤其是整体动物的疾病模型，在评价药物作用方面更为重要。利用动物 模型研究中药活性成分是采用特殊的实验动物模型，将中药模拟中医临床给药，然后从受药动物体内分析中 药活性成分的一种方法。这种方法的实质是利用动物的生理机能将中药活性成分从中药内分离到动物组织 内。再运用分析化学的方法，从动物组织中分离活性成分。日本学者Homma提出了皿清药理学，刘德麟等 提出了生物筛选法用以研究中药活性成分。朱梅刚等建立了抗人大肠癌肝转移动物模型，快速筛选高效低 毒抗肝转移药物。 近十几年来发展起来的转基因动物技术，在人类疾病模型建立中具有重要作用。目前转基因动物技术 日趋成熟，并已应用于医药学领域，它既可作为“生物反应器”使用，也可作为疾病动物模型用于疾病致病机 理及药物筛选的研究。我国利用基因工程技术筛选药物虽然起步比较晚，但是近几年已取得鼓舞人心的进 展，周勇等对转基因动物在药物筛选中的应用进行了综述。 研究和建立新的整体动物病理筛选模型，可以对筛选工作起促进作用，甚至会因此开发出新型的药物， 是药物筛选工作的长期重要任务。转基因技术和基因敲除技术的应用，为建立动物疾病模型提供了有利的 条件，重视转基因技术和基因敲除技术在药物筛选和模型建立中的应用，可以加快药物筛选的速度。目前， 虽然已经建立了大量的药物筛选模型，但仍然有许多疾病还不能在动物身上复制出来，加上生物体内大量内 源性物质的干扰，从受药动物体内分析中药活性成分将比直接分析中药成分更为艰巨，从代谢产物出发推断 活性成分的物质结构也存在较大的困难。建立重大疾病、疑难疾病以及中医病症的动物模型．应通过多方面 分析中医证形成原因，力争使动物模型能够比较全面反映中医的证型实质，还应该注意所选择的实验动物的 ItM差异性，以及性别不均衡性。另外，建立动物筛选的疾病模型时还须明确疾病基因的遗传背景。 2受体模型和分子生物色谱 随着酶学和受体理论的形成和发展，药物的作用靶点逐渐被揭示，迄今为止，已经发现的药物作用靶点 有400余种，1999年沈倍奋对靶点的研究进展作出了综述，新的药物作用靶点还在不断发现。以受体靶点 为目标，寻找与之作用的药物，是药物筛选的重要途径，它克服了整体动物筛选提供药物信息少，以及很多疾 病没有适合的动物模型等缺点。受体筛选药物的方法，已取得了较大进展。 药物作用靶点可以分为受体、酶等类型，王序等在20世纪80年代以受体或酶活性检验为基础．对150 种常用中药的400余种提取物，系统进行了生物活性筛选，得到了5000余种生物活性测定结果，为了解中医 用药的机理提供了一些实验依据。 随着分子生物学技术在药理学领域的渗透，尤其是人类基因组计划的实施，新的受体及其亚型不断发 现，国际上一些大制药公司竞相开展以纯化受体、克隆受体、重组受体为靶标的药物筛选工作，吕秋军等曾对 受体药物筛选作过综述。重组受体是近年来发展起来的一项技术，与传统的制备方法相比，用重组受体技术 制备的受体具有纯度高、制备量大、成本低、用它试验的结果与在人体试验的结果直接相关等优点。鲁春娥 等已尝试使用重组受体技术制备受体进行药物筛选的研究。依据目前可得到的人类基因组信息，越来越多 的与疾病相关的特异受体亚型被识别和确认，成为作用更专一的药物作用靶。Knopfel等在哺乳动物内建立 410 了8种不同的亚型，用于筛选激动剂和拮抗剂。但纯化受体、克隆受体虽然实NT受体与配体特异性结合， 却破坏了受体发挥生物活性的周围环境，而且受体类型单一。事实上，除少数疾病的发病原因与单一靶点有 密切关系外，多数疾病都与多靶点有关系，因而以纯化受体、克隆受体、重组受体为靶标的药物筛选工作可以 用于西药先导化合物的筛选发现，用于中药